负载软骨细胞的透明质酸可注射材料修复软骨缺损

发布时间：2019-11-12 14:29

【摘要】：背景:在软骨组织工程材料中,以透明质酸为代表的多聚糖材料因具备良好的材料细胞作用界面,有利于软骨细胞的生长,成为近年来的研究热点。目的:探究负载软骨细胞的透明质酸可注射材料修复大鼠软骨缺损的可行性。方法:取90只SD大鼠,制备软骨缺损模型,造模后第2天随机分3组干预,实验组关节腔内注射负载软骨细胞的透明质酸水凝胶,对照组关节腔内注射透明质酸水凝胶,空白对照组不进行干预。注射后1,3,6周取修复部位软骨组织,进行苏木精-伊红染色、Masson染色、扫描电镜观察及血红素氧合酶表达、胶原水平检测。结果与结论:①苏木精-伊红染色:注射后6周,空白对照组以肉芽组织填充修复区;对照修复部位被黄白色修复组织填满,与正常软骨边界明显,表面不平整,淋巴细胞较3周时减少;实验组修复组织呈半透明状,与正常软骨边界模糊,淋巴细胞较3周时明显减少;②Masson染色:注射后6周,实验组修复区胶原纤维合成状况最佳,其次为对照组,均强于空白对照组;③扫描电镜观察:注射后6周,空白对照组修复区胶原纤维排列不规则,部分断裂;对照组修复区胶原纤维排列较整齐,仍可见部分断裂;实验组实验部位胶原纤维排列整齐,与正常软骨边缘分界不明;④血红素氧合酶表达与胶原水平:注射后6周,实验组血红素氧合酶表达高于对照组、空白对照组(P0.05);实验组注射后1,3,6周的胶原水平高于对照组、空白对照组(P0.05);⑤结果表明:负载软骨细胞的透明质酸可注射材料可促进大鼠软骨缺损的修复。
【图文】：

饣质跏奔?20±15)min，平均出血量(10±2)mL，90只大鼠中2只因麻醉、1只因术中操作失误出现大失血死亡，2只因术后感染被剔除观察范围，均于术后补充完整。注射后观察6周，所有存活大鼠伤口愈合情况良好，未出现神经损伤、切口裂开等术后并发症。2.2各组光学显微镜下组织学观察结果空白对照组注射后1周时修复部位可见少许肉芽红色组织，偶见淋巴细胞浸润；3周时组织变白，边界清晰，淋巴细胞较前增多；6周时肉芽组织显著增加，已填满修复部位，淋巴细胞明显减少。对照组注射后1周时已被白色的再生组织充满，与正常图1各组注射后不同时间点软骨缺损处病理学观察结果(苏木精-伊红染色，×200)Figure1Pathologicalobservationineachgroupatdifferenttimeafterinjection(hematoxylin-eosinstaining,×200)图注：注射后6周时，空白对照组肉芽组织填满修复部位，淋巴细胞较3周时明显减少；对照组修复部位被黄白色修复组织填满，与正常软骨边界明显，表面不平整，淋巴细胞较3周时减少；实验组修复组织呈半透明状，与正常软骨边界模糊，淋巴细胞较3周时明显减少。图2各组注射后6周时软骨缺损区Msaaon染色结果(×200)Figure2Massonstainingresultsat6weeksafterinjectionineachgroup(×200)图注：图中A为空白对照组，胶原纤维合成情况不佳，骨细胞不成熟；B为对照组，骨细胞开始成熟；C为实验组，成熟骨细胞较多。图3各组注射后6周软骨缺损区扫描电镜观察结果(×2000)Figure5Scanningelectronmicroscopeobservationofthedefectregionat6weeksafterinjectionineachgroup(×2000)图注：图中A为空白对照组，胶原纤维排列不规则，部分断裂；B为对照组，胶原纤维排列较整齐，仍可见部分断裂；C为实验组，胶原纤维排列整齐，与正常软骨边缘分界?

唬嘬馨拖赴鉷飨?减少。对照组注射后1周时已被白色的再生组织充满，与正常图1各组注射后不同时间点软骨缺损处病理学观察结果(苏木精-伊红染色，×200)Figure1Pathologicalobservationineachgroupatdifferenttimeafterinjection(hematoxylin-eosinstaining,×200)图注：注射后6周时，空白对照组肉芽组织填满修复部位，淋巴细胞较3周时明显减少；对照组修复部位被黄白色修复组织填满，与正常软骨边界明显，表面不平整，淋巴细胞较3周时减少；实验组修复组织呈半透明状，与正常软骨边界模糊，淋巴细胞较3周时明显减少。图2各组注射后6周时软骨缺损区Msaaon染色结果(×200)Figure2Massonstainingresultsat6weeksafterinjectionineachgroup(×200)图注：图中A为空白对照组，胶原纤维合成情况不佳，骨细胞不成熟；B为对照组，骨细胞开始成熟；C为实验组，成熟骨细胞较多。图3各组注射后6周软骨缺损区扫描电镜观察结果(×2000)Figure5Scanningelectronmicroscopeobservationofthedefectregionat6weeksafterinjectionineachgroup(×2000)图注：图中A为空白对照组，胶原纤维排列不规则，部分断裂；B为对照组，胶原纤维排列较整齐，仍可见部分断裂；C为实验组，，胶原纤维排列整齐，与正常软骨边缘分界不明。空白对照组对照组实验组注射后1周注射后3周注射后6周ABCABC

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