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银杏LCC制备多孔生物载体及在人体肝细胞培养中的应用

发布时间:2019-11-25 12:18
【摘要】:以银杏木质素-碳水化合物复合体(LCC)为原料,通过洗脱支架的方法制备医用多孔生物载体,并利用红外光谱、液相色谱、核磁共振波谱及扫描电子显微镜对该生物载体的主要成分含量、化学结构以及表面形态进行分析。结果表明:以银杏LCC为原料可以制备性能优良的生物载体。该载体不仅含有愈创木基型苯丙烷结构单元,而且糖组分中对人体肝细胞有较高生物相容性的半乳糖和甘露糖分别占3.30%和21.94%。制备的多孔生物载体孔隙率可达60%以上,平均孔径约为130μm。用多孔生物载体进行人体肝细胞培养,发现人体肝细胞能够成功地在银杏LCC多孔生物载体上生长,且细胞增殖较快,白蛋白分泌和葡萄糖代谢活性的测定结果表明肝细胞具有较高的代谢活性。研究结果表明银杏LCC多孔生物载体具有良好的生物相容性。
【图文】:

曲线,生物载体,生长情况,细胞


86林产化学与工业第34卷图4人体肝细胞L-02在多孔生物载体上黏附生长情况Fig.4GrowthsituationofhumanhepatocytesL-02adhesiononthebiologicalcarrier学观察。图4为细胞第4天在多孔生物载体上的生长情况。从图中可以可看出多孔生物载体表面黏附有许多肝细胞(如图中箭头所示),表明肝细胞能够在银杏LCC多孔生物载体上生长,,证明银杏LCC具有良好的生物相容性。同时也证实了该载体所含的半乳糖和甘露糖对人体肝细胞有良好的亲和性。说明该多孔生物载体可广泛应用于细胞组织工程中。2.2.2人体肝细胞增殖在人体肝细胞L-02培养第1~5天,用血细胞计数板在倒置生物相差显微镜下对实验组和对照组细胞分别进行计数,计数结果如图5(a)所示。从图中可以看出,实验组和对照组培养的细胞在前4天均呈现增长趋势,细胞在前2天都增长较慢,在第3-4天细胞增幅最快,细胞数量达到最高值,并且实验组的人体肝细胞增殖速度明显高于空白对照组人体肝细胞的增殖速度。2.2.3人体肝细胞的代谢活性白蛋白分泌和葡萄糖代谢是肝细胞代谢功能的两个重要指标,加入多孔生物载体培养的肝细胞的白蛋白分泌和葡萄糖代谢活性如图5(b)和图5(c)所示。图5肝细胞生长曲线和代谢活性Fig.5Hepatocytesgrowthcurveandmetabolicactivity由图5中可见,在培养过程中,加入多孔生物载体培养的人肝细胞的白蛋白分泌活性比空白对照组高,在培养的第4天达到最高值,最高为10.45g/(d·L),而空白对照组最高值为6.89g/(d·L),说明加入多孔生物载体培养的人体肝细胞具有较高的代谢活性。与空白试验相比,加入多孔生物载体培养的人体肝细胞的葡萄糖代谢活性较高,进一步说明用银杏LCC制备的多孔生物载体有利于人体肝细胞的培养并维持较高的代谢活性。3结论3.1以银杏木质素

【参考文献】

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