血管内皮生长因子165转染脐静脉内皮细胞与骨髓间充质干细胞共培养在血管形成中的作用

发布时间：2020-01-31 16:10

【摘要】：背景:组织工程骨早期血管化是目前亟待解决的难题,细胞共培养以及添加生物活性因子来促进血管生成均是很好地促进早期血管化的方法。目的:探讨人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)过表达血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor,VEGF165)后与小鼠骨髓间充质干细胞共培养在血管形成中的作用。方法:腺病毒介导VEGF165转染HUVECs,并分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,进行共培养。实验分组如下:(1)转染共培养组:Ad VEGF165-HUVECs+骨髓间充质干细胞;(2)转染非共培养组:Ad VEGF165-HUVECs;(3)空载体共培养组:Ad GFP-HUVECs+骨髓间充质干细胞;(4)空载体组:Ad GFP-HUVECs;(5)未转染共培养组:HUVECs+骨髓间充质干细胞;(6)空白对照组:HUVECs。采用CCK8法检测HUVECs的增殖能力,结晶紫染色检测HUVECs的迁移能力,Matrigel法检测HUVECs的血管形成能力。结果与结论:(1)与空白对照组相比,转染共培养组、转染非共培养组、空载体共培养组、未转染共培养组的细胞增殖能力均明显增加(P0.05);(2)与空白对照组相比,转染共培养组人脐静脉内皮细胞数量最多(P0.05);(3)与空白对照组相比,转染共培养组形成的小管数目更多形成时间更早,更稳定(P0.05);(4)结果表明,VEGF165转染HUVECs和骨髓间充质干细胞共同作为种子细胞能更好地促进早期血管生成。
【图文】：

括计算机数据库)记录及样本已按照有关规定保存、分享和销毁，可接受核查。文章版权：文章出版前杂志已与全体作者授权人签署了版权相关协议。开放获取声明：这是一篇开放获取文章，文章出版前杂志已与全体作者授权人签署了版权相关协议。根据《知识共享许可协议》“署名-非商业性使用-相同方式共享3.0”条款，在合理引用的情况下，允许他人以非商业性目的基于原文内容编辑、调整和扩展，同时允许任何用户阅读、下载、拷贝、传递、打英检索、超级链接该文献，并为之建立索引，用作软件的输入数据或其它任何合法用途。图1腺病毒转染结果(×100)Figure1Humanumbilicalveinendothelialcellstransfectedwithvascularendothelialgrowthfactor165gene(×100)图注：图中A，C为普通光镜下细胞形态；B，D为荧光显微镜下细胞形态。Ad-GFP为空载体组，Ad-VEGF为VEGF过表达组，荧光检测结果显示两组大部分细胞显示绿色荧光。Ad-GFPAd-VEGF图2HUVECs、Ad-GFP-HUVECs和Ad-VEGF-HUVECs的增殖曲线Figure2ThecellgrowthcurvesofHUVECs,Ad-GFP-HUVECsandAd-VEGF-HUVECs图注：3组之间差异无显著性意义(P>0.05)。VEGF：血管内皮生长因子；HUVECs：人脐静脉内皮细胞。胞数量细×10(5)图3小鼠骨髓间充质干细胞的形态(×100)Figure3Themorphologyofmousebonemarrowmesenchymalstemcells(×100)图注：图中A为原代培养骨髓间充质干细胞，大部分细胞贴壁，呈多边形、梭形；B为传代培养骨髓间充质干细胞，细胞多呈梭形。光度值吸图4人脐静脉内皮细胞/骨髓间充质干细胞共培养后人脐静脉内皮细胞增殖能力变化Figure4Theproliferationabilityofhumanumbilicalveinendothelialcellsafterco-culturewithbonemarrowmesenchymalstemcells图注：转染?

硪，

本文编号：2575085