人脂肪脱细胞基质促进SD大鼠皮肤全层缺损创面愈合的研究

发布时间：2020-07-20 18:50

【摘要】：目的:通过系统化的方式将脂肪组织进行脱细胞处理,提取细胞外基质成分,制备脱细胞基质材料,通过组织学、细胞学及动物学检查,证实人脂肪脱细胞基质材料有利于促进体细胞及干细胞的粘附、增殖、迁移及干细胞的分化,有利于促进SD大鼠全层皮肤缺损的创面愈合,可作为理想的组织修复材料之一。方法:通过乳糜化处理、胰酶消化、异丙醇萃取等相关处理进行脂肪组织脱细胞化,提取细胞外基质成分,冻干制成脂肪脱细胞基质材料。通过HE染色、DAPI染色、油红O染色、扫描电镜观察评价脱细胞基质材料内细胞及细胞成分清除情况。通过病理切片染色进行细胞外基质主要成分胶原蛋白的定性检测。通过体外条件下在脱细胞基质材料上接种人脐静脉内皮细胞,观察不同时间段人脐静脉内皮细胞与细胞基质材料的粘附及增殖情况。通过诱导接种到脱细胞基质材料上的人脂肪干细胞向脂肪细胞分化,观察脱细胞基质材料促进脂肪干细胞分化功能。建立SD大鼠全层皮肤缺损模型,设立自愈组、脂肪脱细胞基质材料组、人脂肪干细胞组,比较不同组间创面愈合时间及病理学改变,观察脂肪脱细胞基质材料在促进创面愈合的作用。结果:通过乳糜化处理、胰酶消化、异丙醇萃取后制备的脂肪脱细胞基质材料脱细胞彻底,无细胞及细胞成分残留,细胞外基质的主要成分胶原蛋白保存较好,具有适宜细胞良好生长的孔径,有利于促进体细胞及干细胞的粘附、迁移、增殖及干细胞分化的能力,并具有促进血管内皮细胞呈现“管腔”样分布。脱细胞基质材料能够有效的促进SD大鼠全层皮肤缺损的创面愈合,并能较好的改善创面愈合的质量。结论:研究结果表明脂肪脱细胞基质支架材料脱细胞彻底,有效成分保留良好,具有良好的生物相容性,有利于促进体细胞及干细胞的粘附、迁移、增殖及干细胞分化的能力,并可以有效的促进SD大鼠全层皮肤缺损创面愈合,并能较好的改善创面愈合的质量,可作为创面修复良好的生物支架材料。
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R318.08
【图文】：

脂肪组织,残余创面,脂肪,材料

指标28 天每组各随机取材 3 只，麻醉后拍照，im据公式计算残余创面所占原创面的百分比。性福尔马林固定 36 小时，脱水，石蜡包埋比=残余创面面积×100%原始创面面积数±标准差表示。应用 SPSS 17.0 软件处理，采用独立样本 t-检验比较不同时间段基质P<0.05 为差异有统计学意义。的制备及镜下观

电镜,多孔状结构,基质材料,孔径大小

电镜下可见基质材料为疏松多孔状结构，孔径大小为80-200μm

多孔状结构,光镜,形态,材料

17 3 PBS 浸泡后，脱细胞基质材料仍保持其原有形态，未见分解及分散，光镜下为大小不的多孔状结构。脂肪颗粒组织经纳米脂肪切割器处理，离心后可除去大部分油脂成分，经/EDTA 消化后可去除大部分细胞成分，异丙醇萃取剩余油脂城后，可获得色胶样细胞外基质成分，经冻干处理后可获得脱细胞基质支架材料，并可制不同形状及大小的脱细胞基质材料（图 1）。扫描电镜下可见冻干的脂肪脱基质材料为疏松的多孔状结构，孔径大小为 80-200μm（图 2）。PBS 浸泡，仍保持其原有形态，未见分解及分散，光镜下为大小不一的多孔状结构（

【参考文献】