载血管内皮生长因子硫酸钙人工骨对骨再生以及血管再生的作用研究

发布时间：2020-07-22 08:52

【摘要】：研究背景由于骨折、骨感染、骨肿瘤等疾病的发生,由此导致的骨缺损一直是临床治疗的难点。自体骨移植是金标准,但人工骨替代材料在今年亦层出不穷。目前应用最广泛的主要是磷酸钙、硫酸钙以及以其为支架的一些复合材料,而其中硫酸钙具有骨传导性,降解时间适宜,与药物结合不发热等优点,故其应用的普遍性高于磷酸钙。目前临床上使用硫酸钙大多单纯植入,或混合敏感抗生素,对于其负载促血管生长相关因子治疗骨缺损的研究及应用甚少。众所周知,移植物快速血管化有利于其成活并修复缺损[1]。故提高人工骨血管化能力将极大地提升其骨修复性能。既往对硫酸钙进行改性、增强其骨修复能力的研究,大多是将其与PLGA、聚丙酯等有机材料结合组成新的复合材料[2_4]。通过检索文献、并未发现将硫酸钙人工骨与促血管生长因子结合后植入的相关报道。本研究使用3.0mm克氏针在大鼠股骨远端造骨缺损模型,然后分别不植入、植入单纯硫酸钙、植入载不同剂量VEGF的硫酸钙在术后不同时间通过各种检测方式观察分析骨再生和血管再生的变化情况。研究目的探讨骨缺损处不植入、植入单纯硫酸钙、植入载不同剂量VEGF的硫酸钙后骨再生以及血管再生的不同变化。研究方法1、实验动物及其分组,骨缺损模型的建立,材料植入手术。将共75只成年雄性大鼠分为2w、4w、6w三个时间点处理组,使用3.0mm克氏针在大鼠股骨远端造骨缺损。每组25只大鼠又随机分为5个不同处理方式组。取左股骨远端作骨缺损,造模后按照不同处理方式植入材料后关闭切口。常规喂养。2、标本处理术后各组动物定期拍摄X线片。在时间处理点,取出左股骨常规固定,以及制片和血管造影。3、检测指标X-ray检查:所有实验大鼠均通过X-ray(Gendex Dental System,Milan,Italy)检查。Micro-CT检测:已行血管造影的实验大鼠股骨在脱钙前后均通过小动物Micro-CT(Skyscanl176,Bruker Micro-CT,Belgium)扫描其远端手术区(包含手术区远近端2mm区域)。计算分析使用配套ANT Software(Skyscan1 176)软件。组织形态学检测:切片经过HE染色以及免疫荧光检查。带有成像分析功能的成像系统(Leica DFC450C)和倒置荧光显微镜(Leica DM IL LED FLUO)被分别用于观察HE染色切片和免疫荧光染色切片。结果从组织学检查、X线以及Micro-CT的检查可见,添加了 VEGF后,硫酸钙的成骨能力增强,材料植入后血管化进程更快,大大加速了骨缺损的修复。结论植入硫酸钙组比空白组骨再生及血管再生更快,而且负载VEGF的硫酸钙可以更明显地促进骨及血管再生,增强硫酸钙的骨修复能力。
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R68;R318.08
【图文】：

血管造影,时间点,实验组,血管

逦项士学位论文逦逡逑３．实验鼠左股骨脱钙后的血管ＭｉｃｒｏＣＴ检查结果逡逑从ＭｉｃｒｏＣＴ成像图中可见，同一时间点处理组中，对照组比空白组血管无逡逑明显增多，而随着添加ＶＥＧＦ并且随着剂量的增多，血管明显增多；在相同处逡逑理方式的组别中，随着时间的推移、血管生成逐渐增多。具体见图４－３逡逑空白组逦对照组逦实验组１逦实验组２逦实验组３逡逑

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