基于静电纺丝技术的自体来源纤维蛋白原组织工程支架的制备

发布时间：2020-09-24 05:14

　　目的:探索基于静电纺丝技术制备以自体废弃血液为材料构建组织工程生物支架薄膜的方法,评价支架材料的特性及生物相容性,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。方法:将术中自体废弃血液通过固液分离、离心、纯化、干燥等步骤提纯出纤维蛋白原,经静电纺丝技术制作成纤维蛋白原支架薄膜。观察不同纤维蛋白原浓度所得电纺支架的大体形态,扫描电镜观察材料的三维结构,通过检测体外降解率、亲水性能、表面粗糙度等测定支架材料的特性;与人骨髓间充质干细胞进行体外共培养,通过检测细胞活性、细胞增殖率等评价该支架材料的生物相容性;通过动物体内实验观察材料对皮损的修复情况。结果:以自体废弃血液为材料的组织工程生物支架成膜性良好,纤维结构清晰可见,经扫描电镜可见以130 mg/ml组的浓度下的电纺支架纤维直径较为均匀、孔隙大小一致的纵横交错的纤维结构,细胞在支架材料中生长良好并分泌较多的细胞基质;各组接触角测试均小于90°;将人骨髓间充质干细胞与支架材料共培养后向成骨和成软骨方向分化,经特异性染色效果较明显;细胞增殖实验证明细胞随着天数的增加呈增长趋势;DAPI染色和Live/dead实验证明支架材料有良好的生物相容性。结论:废弃血液是一种主要的医院废弃物,处理废弃血液需要耗费大量资源,本研究在短时间内从废弃血液中成功电纺制作成固态三维结构样物质,研究成果初步表明该方法及材料在组织工程领域中有极大的发展潜力,其良好的生物相容性及物理特性还可能使其成为皮肤创伤和骨诱导膜技术等应用的理想选择。
【学位单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R318.08
【部分图文】：

结构图,微观纤维,扫描电镜观察,泰勒锥

细不均并有大量液滴状结构；B 组可见排列有序的多层纤维结构，纤维直径、孔径大小接近一致，少量液滴状结构；C 组未见纤维结构。图2 扫描电镜观察A、B、C三组微观纤维结构（×8000）Fig. 2 Scanning electron microscopy A, B, C three groups of micro-fiberstructure (× 8000)2.3 低温喷雾干燥技术处理后电纺时泰勒锥结构图 3 经低温喷雾干燥技术处理后的纤维蛋白原材料在电场下形成的泰勒锥结构A B C

泰勒锥,纤维蛋白原,技术处理,纤维结构

描电镜观察通过扫描电镜观察电纺后的支架可见（图 2）：A 组可见纤维结构均并有大量液滴状结构；B 组可见排列有序的多层纤维结构，纤维小接近一致，少量液滴状结构；C 组未见纤维结构。图2 扫描电镜观察A、B、C三组微观纤维结构（×8000）Fig. 2 Scanning electron microscopy A, B, C three groups of micro-structure (× 8000)温喷雾干燥技术处理后电纺时泰勒锥结构

结构图,扫描电镜观察,纤维结构,液滴

12图1 三组血液干燥后的大体观Fig. 1 The general view of three groups of fibrinogen after drying2.2 扫描电镜观察通过扫描电镜观察电纺后的支架可见（图 2）：A 组可见纤维结构，纤维粗细不均并有大量液滴状结构；B 组可见排列有序的多层纤维结构，纤维直径、孔径大小接近一致，少量液滴状结构；C 组未见纤维结构。图2 扫描电镜观察A、B、C三组微观纤维结构（×8000）Fig. 2 Scanning electron microscopy A, B, C three groups of micro-fiberstructure (× 8000)2.3 低温喷雾干燥技术处理后电纺时泰勒锥结构图

【参考文献】