钛离子对Jurkat T淋巴细胞KCa3.1通道的影响

发布时间：2020-10-15 05:48

　　 目的:观察钛离子作用于Jurkat T淋巴细胞后KCa3.1通道表达情况及阻断KCa3.1通道前后细胞膜电位、胞内钙离子变化,探讨KCa3.1通道在钛离子对JurkatT淋巴细胞活化中可能存在的作用机制。方法:1、体外培养Jurkat T淋巴细胞,采用植物凝血素(PHA)预活化,CCK8法检测不同浓度钛离子对活化Jurkat T淋巴细胞的增殖影响。2、根据是否被植物凝血素(PHA)预活化,将Jurkat T淋巴细胞分为PHA(+)及PHA(-)两大组,两组分别加入浓度为0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L钛离子,作用12h后,实时荧光定量多聚酶链反应技术(Real-time PCR)检测KCa3.1通道的表达量。流式细胞术检测TRAM-34阻断前后Jurkat T淋巴细胞膜电位及细胞内钙离子浓度的变化。结果:1、钛离子对预活化Jurkat T淋巴细胞随着钛离子的浓度的增加增殖更加明显(P﹤0.05)。2、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度的钛离子在PHA(-)Jurkat T淋巴细胞作用的下培养12小时,随着钛离子浓度的增加KCa3.1mRANA相对于对照组表达增加,差异没有统计学意义(P﹥0.05)。25μmol/L,50μmol/L,100μmol/L浓度的钛离子在PHA(+)Jurkat T淋巴细胞作用的下培养12小时,随着钛离子浓度的增加KCa3.1mRANA表达增加,差异有统计学意义(P﹤0.05)。3.KCa3.1通道被TRAM-34阻断后,50μmol/L钛离子(PHA-)Jurkat T淋巴细胞组的膜电位与不加钛离子组比较差异无统计学意义(P﹥0.05),TRAM-34(+)与TRAM-34(-)组间比较差异有统计学意义(P﹤0.05);50μmol/L钛离子(PHA+)Jurkat T淋巴细胞组的膜电位与对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05),TRAM-34(+)与TRAM-34(-)组间比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。50μmol/L钛离子(PHA-)Jurka T淋巴细胞组的钙离子浓度与对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05),TRAM-34(+)与TRAM-34(-)组间比较差异无统计学意义(P﹥0.05);50μmol/L钛离子组(PHA+)Jurkat T淋巴细胞组的钙离子浓度与对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05),TRAM-34(+)与TRAM-34(-)组间比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论:1.100μmol/L以内的钛离子能增加活化Jurkat T淋巴细胞的增殖效应。2.钛离子可引起活化Jurkat T淋巴细胞KCa3.1通道表达的改变。3.KCa3.1通道可在一定程度上调节钛离子对活化Jurkat T细胞内钙离子浓度及膜电位。
【学位单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R783.1
【部分图文】：

图 1-1 不同活化状态下的 JurkatT 淋巴细胞Figure 1-1 The different activation states of T cellsA.植物血凝素作用 12 小时，增殖形成集落，近似葡萄串；B.加入不同浓度钛离子后集落成球形。A;PHA activated T lymphocytes.B; PHA activated T lymphocytes cultured with Titanium Ions.2.2 钛离子对活化 Jurkat T 淋巴细胞增殖的影响

图 1-1 不同活化状态下的 JurkatT 淋巴细胞Figure 1-1 The different activation states of T cellsA.植物血凝素作用 12 小时，增殖形成集落，近似葡萄串；B.加入不同浓度钛离子后集落成球形。A;PHA activated T lymphocytes.B; PHA activated T lymphocytes cultured with Titanium Ions.2.2 钛离子对活化 Jurkat T 淋巴细胞增殖的影响A

确认好扩增曲线和融解曲线，分别计算同一样本每个复孔 KCa3.1及 GAPDH的平均 Ct值，运用公式2 ΔΔ CT得出 KCa3.1相对定量值。 ΔΔCT=（实验组KCa3.1 Ct值-实验组GAPDH Ct值）-（对照组KCa3.1 Ct值-对照组GAPDH Ct值）。1.3统计学处理采用SPSS19.0软件进行统计学分析，数据结果均以 x±s表示。计量资料三组及三组以上比较采用One-way ANOVA 分析，组组之间比较采用LSD法。 检验水准α=0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。2.结果2.1 钛离子对 Jurkat T 淋巴细胞 KCa3.1 通道基因表达的影响b
【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 侯春梅;李新颖;叶伟亮;曹曦元;肖鹤;黎燕;;MTT法和CCK-8法检测悬浮细胞增殖的比较[J];军事医学科学院院刊;2009年04期

2 王林红;樊立洁;谷志远;;钛离子诱导骨吸收的现象及机制[J];国际口腔医学杂志;2009年04期

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1 庞振华;钛离子对T细胞膜电位及Kv1.3通道的影响[D];广西医科大学;2016年

2 李秋莹;钛离子对T细胞内钙离子浓度影响的研究[D];广西医科大学;2015年

本文编号：2841789