脂肪间充质干细胞及其构建物新型低温保存方法研究

发布时间：2021-01-09 09:28

　　低温保存对于细胞、组织、器官甚至新近出现的生物复合物的长期储存是一种有效的不可或缺的方法,被广泛应用到干细胞治疗、生物组织工程、再生医学等生物医学领域。低温的深度保存（-196℃）主要包括慢速降温的两步法保存和快速的玻璃化保存。慢速降温的两步法保存是目前应用最广的方法,但仍然存在着一定的缺陷,尤其是在干细胞及生物材料的保存中。在慢速降温的两步法保存过程中,细胞或生物材料内会产生冰晶,这将造成细胞和生物材料的机械性损伤,而且在慢速降温过程中还存在着溶质损伤。同时,干细胞的慢速保存可能会影响干细胞功能等。玻璃化低温保存可以避免在冷冻降温时冰晶的形成,但是传统的玻璃化保存应用到了高浓度的低温保护剂,这会造成细胞的毒性损伤。因此,探索低浓度低温保护剂下的玻璃化低温保存方法是非常必要的。低浓度玻璃化保存方法面临最大的挑战是复温过程中再结晶的发生,所以,了解再结晶发生的原因以及影响因素是非常重要的。本文首先利用低温显微镜检测了悬浮和贴壁两种状态下的细胞在不同降温速率下和不同溶液中的胞内冰和再结晶的形成概率以及冷冻复温后细胞的活性。其结果发现,随着降温速率的增加,胞内冰和再结晶的形成概率有所增加。同... 

【文章来源】：中国科学技术大学安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：123 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．１冷冻消融时产生的可能的即时免疫效应［１１］??生物体之所以能在低温环境下（－１９６?°Ｃ）长期保存，其主要是因为在低温??

形状也温度有关。在零度时结冰，冰晶的形状多为六角对称的，一般均会沿着主??轴的方向向前生长，同时还会形成副轴，当把所有冰晶连接起来后，则形成了一??个具有一定形成的网络结构，如图１．２（ａ）所示。而当冰晶形成在较低温度时，由??于冰晶失去了对六角对称形结构的识别能力，同时冰晶成核数量增加，再加上降??温速率过快，最终导致了冰晶结构成树枝状等，如图１．２（ｂ）所示。冻存溶液中冰??晶形状和生长速率对生物样品的保存效率都有一定的影响［１７－１９］。??图１．２不同条件下形成不同形状的冰晶。（ａ）六角对称形冰晶［２０］；?（ｂ）树枝状冰晶［２１］。??３??

第１章绪论研宄表明在慢速冷冻的低温保存中，引起细胞损伤的重１９７２年提出的“两－因素”假说［２２］，即在生物样品的低温保般受到两个独立因素的影响，其一是由与冷却速率有关的胞率越快，其损伤越大；其二是溶质损伤，由于冷却的速率过溶液中暴露的时间较长，损伤就越大。整合这两种因素的影个最佳的降温速率，以确保低温保存后的细胞维持较高的活ｉ?＞??

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2966389