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低免疫原性脱细胞神经基质的制备及其理化性能

发布时间:2021-02-01 07:24
  目的:制备低免疫原性异种脱细胞神经基质并评估其理化性能。方法:以α-1,3-半乳糖苷转移酶基因敲除(GTKO)猪坐骨神经为实验原料对基因敲除猪坐骨神经进行脱细胞处理制备低免疫原性异种脱细胞神经基质,通过HE、DAPI染色及DNA残留量检测评价神经组织的脱细胞效果;I型胶原、层黏连蛋白、纤连蛋白免疫组织化学及天狼猩红染色评价脱细胞神经细胞外基质组分保留情况;α-1,3-半乳糖基(a-gal)免疫荧光检测异种抗原a-gal的残留;扫描电镜(SEM)分析脱细胞神经三维组织结构及孔隙率。结果:组织染色显示脱细胞神经基质内膜、外膜、束膜中的细胞均去除干净,DNA定量结果显示DNA含量下降了95%。天狼猩红染色及免疫组织化学结果显示脱细胞神经组织较好地保留了胶原纤维与细胞外基质主要蛋白。SEM结果显示脱细胞神经较好地保留了其三维组织结构,细胞毒性检测表明脱细胞神经基质无细胞毒性。结论:本研究自主设计的四联脱细胞方案能彻底去除神经组织中的细胞成分与异种抗原,并且较完整地保留了神经组织结构,与天然神经具有高度相似性。 

【文章来源】:温州医科大学学报. 2020,50(06)

【文章页数】:7 页

【部分图文】:

低免疫原性脱细胞神经基质的制备及其理化性能


天然神经(A、B)和脱细胞神经(C、D)HE染色

神经,细胞,猩红,细胞核


天然神经(A)和脱细胞神经(B)DAPI染色(蓝色荧光代表细胞核)

神经,胶原,猩红,细胞


天然神经(A)和脱细胞神经(B)天狼猩红染色(红色代表胶原纤维)

【参考文献】:
期刊论文
[1]神经导管支架修复外周神经损伤的研究与现状[J]. 陈勇,范林,付贞,熊艳,王彦峰,叶啟发,秦伟.  中国组织工程研究. 2017(30)
[2]成年大鼠许旺细胞复合去细胞神经支架修复坐骨神经缺损[J]. 周丽娜,崔晓军,苏开鑫,王晓红,蔡雪彦,郭金华,纳青青.  器官移植. 2015(04)
[3]α-Gal抗原与动物源性医疗器械免疫原性风险控制[J]. 柯林楠,方玉,单永强,冯晓明,徐丽明,王春仁.  中国组织工程研究. 2014(25)
[4]异种异体脱细胞神经支架制备的实验研究[J]. 黄保岗,何红云,段勇,高敏,黎永志,高也悦.  大理学院学报. 2010(08)
[5]以Triton X-100和脱氧胆酸钠为萃取剂制备兔脱细胞神经基质:有最佳时间吗?[J]. 姜炜鹏,左金华,李继奎,刘道峰,徐杰,丁长岭.  中国组织工程研究与临床康复. 2009(47)

博士论文
[1]保留软骨的去细胞全喉支架的实验研究[D]. 马瑞娜.第四军医大学 2013

硕士论文
[1]应用Ⅰ型胶原蛋白神经导管修复重建前臂正中神经损伤[D]. 阿布都如苏力·阿布力克木.新疆医科大学 2016
[2]Myroilysin脱细胞异种神经支架的制备及生物力学性能研究[D]. 安祥莲.山东大学 2015
[3]脱细胞神经基质的制备及组织相容性研究[D]. 姜炜鹏.滨州医学院 2010
[4]异种脱细胞神经移植物制备方法及生物学评价[D]. 王维戚.佳木斯大学 2009



本文编号:3012409

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