RGD接枝氧化海藻酸钠/N-琥珀酰壳聚糖复合水凝胶的制备及体外诱导分化研究
发布时间：2021-02-06 00:22
水凝胶是由高分子材料交联而形成的物质,其骨架为多孔的网状结构。水凝胶的含水量丰富,与人体组织极为相似,可用作组织工程支架材料。本研究以海藻酸钠和壳聚糖为主要原料,以期制备出具有更好综合性能的复合水凝胶骨组织工程支架材料。考虑到海藻酸钠的降解性能及壳聚糖的溶解性能较差等缺点,且较强的亲水性不利于细胞粘附,为此,我们将对它们进行RGD接枝改性及复合研究。本研究将用高碘酸钠将海藻酸钠氧化,从而在其分子链上引入活性醛基并改善其降解性能。用丁二酸酐与壳聚糖反应生成N-琥珀酰壳聚糖,以提高其溶解性能。通过在氧化海藻酸钠分子上接枝RGD肽链,以提高材料的细胞粘附性能及生物活性。利用氧化海藻酸钠中的醛基与N-琥珀酰壳聚糖中的氨基发生席夫碱反应交联而得到复合水凝胶。实验制备了不同V（N-SC）/V（OSA）配比的复合水凝胶,并研究了其力学和降解等性能。研究发现V（N-SC）/V（OSA）=8/2的水凝胶的压缩强度为32.5kPa,降解时间为2个月左右,是各组中最为理想的组织工程支架材料。通过在体外对复合水凝胶材料与骨髓间质干细胞的共培养,研究了复合水凝胶对细胞黏附、增殖等细胞行为的影响。研究结果显示：R...
【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
1.1 前言
1.2 骨组织工程
1.2.1 组织工程概述
1.2.2 骨组织工程
1.2.3 骨组织工程支架
1.2.4 骨组织工程支架分类
1.3 骨组织工程支架材料的研究面临的主要问题
1.4 水凝胶
1.4.1 水凝胶的分类
1.4.2 水凝胶的制备
1.4.3 水凝胶的应用及改性
1.5 海藻酸盐和壳聚糖
1.5.1 海藻酸盐的结构和性质
1.5.2 壳聚糖的结构和性质
1.6 本文研究目的和意义、主要内容与创新点
1.6.1 本文研究目的和意义
1.6.2 本文研究主要内容
1.6.3 本文研究主要创新点
第2章 氧化海藻酸钠的制备、改性与表征
2.1 引言
2.2 实验材料及设备
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验设备
2.3 实验部分
2.3.1 氧化海藻酸钠的制备
2.3.2 RGD与氧化海藻酸钠的接枝
2.4 氧化海藻酸钠表征
2.4.1 红外光谱分析
2.4.2 氧化度的测定
2.5 数据统计学处理
2.6 结果与分析
2.6.1 海藻酸钠的氧化
2.6.2 氧化剂的加入量和反应时间对海藻酸钠氧化度的影响
2.6.3 氧化海藻酸钠上接枝RGD
2.7 本章小结
第3章 N-琥珀酰壳聚糖的合成和表征
3.1 引言
3.2 实验材料及设备
3.2.1 实验材料
3.2.2 实验设备
3.3 实验部分
3.3.1 N-琥珀酰壳聚糖的制备
3.3.2 N-琥珀酰壳聚糖的表征
3.4 数据统计学处理
3.5 结果与分析
3.5.1 N-琥珀酰壳聚糖合成机制
3.5.2 N-琥珀酰壳聚糖的红外光谱分析
3.5.3 N-琥珀酰壳聚糖取代度的测定
3.5.4 N-琥珀酰壳聚糖溶解性分析
3.6 本章小结
第4章 复合水凝胶的制备
4.1 引言
4.2 实验材料及设备
4.2.1 实验材料
4.2.2 实验设备
4.3 实验部分
4.3.1 实验步骤与方法
4.3.2 复合水凝胶的表征
4.4 结果与分析
4.4.1 红外光谱分析
4.4.2 形貌表征
4.4.3 力学性能测试
4.4.4 体外降解实验
4.5 本章小结
第5章 复合水凝胶对骨髓间充质干细胞分化的影响
5.1 前言
5.2 实验材料及设备
5.2.1 实验材料
5.2.2 实验设备
5.3 细胞体外培养
5.3.1 器材及细胞培养溶液
5.3.2 材料灭菌和预处理
5.3.3 细胞接种
5.4 rBMSCs细胞体外表征
5.4.1 Alamar blue
5.4.2 AO-PI荧光染色
5.5 体外分化
5.5.1 体外成骨分化
5.5.2 体外内皮分化
5.6 数据的统计学意义
5.7 结果与分析
5.7.1 细胞增殖结果分析
5.7.2 AO-PI荧光染色
5.7.3 成骨分化分析
5.7.3.1 碱性碟酸酶活性分析
5.7.3.2 碱性磷酸酶染色
5.7.3.3 茜素红染色分析
5.7.4 内皮分化分析-免疫荧光染色分析
5.8 本章小结
结论
致谢
参考文献
攻读硕士期间发表的论文及科研成果
本文编号：3019828
【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
1.1 前言
1.2 骨组织工程
1.2.1 组织工程概述
1.2.2 骨组织工程
1.2.3 骨组织工程支架
1.2.4 骨组织工程支架分类
1.3 骨组织工程支架材料的研究面临的主要问题
1.4 水凝胶
1.4.1 水凝胶的分类
1.4.2 水凝胶的制备
1.4.3 水凝胶的应用及改性
1.5 海藻酸盐和壳聚糖
1.5.1 海藻酸盐的结构和性质
1.5.2 壳聚糖的结构和性质
1.6 本文研究目的和意义、主要内容与创新点
1.6.1 本文研究目的和意义
1.6.2 本文研究主要内容
1.6.3 本文研究主要创新点
第2章 氧化海藻酸钠的制备、改性与表征
2.1 引言
2.2 实验材料及设备
2.2.1 实验材料
2.2.2 实验设备
2.3 实验部分
2.3.1 氧化海藻酸钠的制备
2.3.2 RGD与氧化海藻酸钠的接枝
2.4 氧化海藻酸钠表征
2.4.1 红外光谱分析
2.4.2 氧化度的测定
2.5 数据统计学处理
2.6 结果与分析
2.6.1 海藻酸钠的氧化
2.6.2 氧化剂的加入量和反应时间对海藻酸钠氧化度的影响
2.6.3 氧化海藻酸钠上接枝RGD
2.7 本章小结
第3章 N-琥珀酰壳聚糖的合成和表征
3.1 引言
3.2 实验材料及设备
3.2.1 实验材料
3.2.2 实验设备
3.3 实验部分
3.3.1 N-琥珀酰壳聚糖的制备
3.3.2 N-琥珀酰壳聚糖的表征
3.4 数据统计学处理
3.5 结果与分析
3.5.1 N-琥珀酰壳聚糖合成机制
3.5.2 N-琥珀酰壳聚糖的红外光谱分析
3.5.3 N-琥珀酰壳聚糖取代度的测定
3.5.4 N-琥珀酰壳聚糖溶解性分析
3.6 本章小结
第4章 复合水凝胶的制备
4.1 引言
4.2 实验材料及设备
4.2.1 实验材料
4.2.2 实验设备
4.3 实验部分
4.3.1 实验步骤与方法
4.3.2 复合水凝胶的表征
4.4 结果与分析
4.4.1 红外光谱分析
4.4.2 形貌表征
4.4.3 力学性能测试
4.4.4 体外降解实验
4.5 本章小结
第5章 复合水凝胶对骨髓间充质干细胞分化的影响
5.1 前言
5.2 实验材料及设备
5.2.1 实验材料
5.2.2 实验设备
5.3 细胞体外培养
5.3.1 器材及细胞培养溶液
5.3.2 材料灭菌和预处理
5.3.3 细胞接种
5.4 rBMSCs细胞体外表征
5.4.1 Alamar blue
5.4.2 AO-PI荧光染色
5.5 体外分化
5.5.1 体外成骨分化
5.5.2 体外内皮分化
5.6 数据的统计学意义
5.7 结果与分析
5.7.1 细胞增殖结果分析
5.7.2 AO-PI荧光染色
5.7.3 成骨分化分析
5.7.3.1 碱性碟酸酶活性分析
5.7.3.2 碱性磷酸酶染色
5.7.3.3 茜素红染色分析
5.7.4 内皮分化分析-免疫荧光染色分析
5.8 本章小结
结论
致谢
参考文献
攻读硕士期间发表的论文及科研成果
本文编号：3019828
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/swyx/3019828.html
