诱导向尿路上皮分化的脂肪干细胞与膀胱脱细胞基质支架的生物相容性研究

发布时间：2021-03-28 02:34

　　目的探讨脂肪干细胞向尿路上皮细胞分化的可行性,并将诱导后细胞与膀胱脱细胞基质复合培养,评价细胞与支架材料的生物相容性,为进一步构建组织工程化组织提供实验基础。方法取6只8周龄雄性新西兰大白兔的腹股沟脂肪组织和膀胱组织,通过胶原酶消化法分离脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）,同时通过胰蛋白酶消化的方法获取尿路上皮细胞,流式细胞鉴定后将第3代脂肪干细胞与尿路上皮细胞间接共培养2周,并对分化后细胞进行表型鉴定。随后将分化后细胞种植在膀胱脱细胞基质上,通过扫描电镜、组织学切片观察诱导后细胞在膀胱脱细胞基质上的生长情况。结果脂肪干细胞培养成功并在体外扩增,流式术检测表面抗原CD分子,细胞高表达CD29（99.6%）、CD44（98.2%）;低表达CD31（1.9%）及CD45（1.6%）。通过间接共培养诱导分化后,细胞免疫荧光、Western blotting检测到尿路上皮标志物UPIa的表达,而未诱导的脂肪干细胞无表达。扫描电镜提示诱导后细胞在膀胱脱细胞基质上生长,黏附较好。组织学检查可见膀胱脱细胞基质表面细胞平铺生长。结论脂肪干细胞向尿路上皮诱导分... 

【文章来源】：中华全科医学. 2020,18(06)

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

ADSCs不表达UPIa(×200)

为进一步确认ADSCs诱导后分化的效果,本实验中通过免疫荧光检测诱导后细胞尿路上皮细胞特异性蛋白UPIa的表达,将诱导后细胞爬片行免疫荧光检测,结果提示:未诱导分化的ADSCs不表达特异性UPIa蛋白(图4),而进行共培养诱导后细胞可出现UPIa的表达(图5)。通过Western blotting检测尿路细胞特异性蛋白UPIa的表达水平,经诱导培养后,诱导后细胞的尿路上皮细胞特异性蛋白UPIa表达上调,而未诱导的ADSCs这2种特异性蛋白呈低表达状态(图6),结果与免疫荧光的结果相符,上述这些结果表明,脂肪干细胞在共培养体系的诱导下,诱导后的细胞已向尿路上皮细胞分化,具有尿路上皮的表型。图2 ADSCs原代培养第10天(×40)

ADSCs原代培养第10天(×40)

【参考文献】：
期刊论文
[1]膀胱尿路上皮癌患者血清CA125的检测及其临床意义[J]. 冯瑞,李中兴,沈斌,王星,葛广成,吴丹,贾跃军.  海南医学. 2015(20)



本文编号：3104713