磷酸盐纳米酶的构建及细胞释放超氧负离子检测

发布时间：2021-04-29 00:01

　　超氧负离子在生命体新陈代谢过程中具有非常重要的作用,在正常生理情况下,机体内活性氧（ROS）的产生和清除会维持在一个动态平衡。而当活性氧浓度失常往往伴随着疾病的发生。高浓度的活性氧会导致DNA和蛋白质的氧化损伤,甚至会导致癌症、心血管疾病、神经系统退行性疾病和衰老等。超氧负离子的快速、可靠、灵敏、实时动态检测对于相关病理研究、疾病诊断和健康筛查具有重要意义。但由于超氧负离子半衰期短,活性高,易与生物环境中其他小分子发生反应等问题,要想实现超氧负离子实时动态检测极具挑战。目前检测超氧负离子的方法得到一定的发展,但仍不足,其中电子自旋共振捕获法,需要昂贵的设备和相应的捕获剂。分光光度法操作简单,成本低,但检测限、灵敏度和抗干扰能力有待提高。化学发光法是另一种易于操作和快速检测的方法,可用于活性氧的痕量分析,然而,它需要开发一种专用荧光素。荧光光度法可以提供细胞内目标分子的时空信息检测,但灵敏度和选择性不足。与上述方法相比,电化学分析法由于能在复杂系统中快速进行实时检测,被认为是最有前途的测定超氧负离子的方法。但电化学分析方法中,构建具备生物相容性、高催化活性及灵敏的检测平台,是超氧负离子原... 

【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
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第1章 绪论
    1.1 引言
    1.2 细胞释放ROS的生理、病理意义
    1.3 细胞释放ROS的检测现状
    1.4 纳米酶生物传感器的构建
        1.4.1 生物传感器的发展、原理及特点
        1.4.2 纳米酶用于传感的检测原理
        1.4.3 纳米酶构建传感器的优势及存在的问题
    1.5 选题依据及创新点
第2章 实验方法
    2.1 主要试剂与仪器
        2.1.1 试剂
        2.1.2 主要仪器
    2.2 材料合成及性质表征
        2.2.1 材料的合成方法
        2.2.2 材料性质表征
    2.3 电化学性能测试
        2.3.1 工作电极的制备
        2.3.2 丝网印刷电极的制备
        2.3.3 实验装置
        2.3.4 性能测试
第3章 静电纺丝制备FePO_4/rGO-C纳米纤维及其超氧负离子传感应用
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 FePO_4/rGO-C纳米纤维的制备
        3.2.2 细胞培养和实时监测细胞释放O_2~―·
        3.2.3 物理表征
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 FePO_4/rGO-C和FePO_4/C的物理表征和元素组成分析
        3.3.2 电化学测量与分析
        3.3.3 芯片用于细胞样品分析
    3.4 结论
第4章 构建纳米-Mn_3(PO_4)_2-壳聚糖传感界面原位检测细胞释放超氧负离子
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 制备CTS-Mn_3(PO_4)_2样品
        4.2.2 材料的物理表征
        4.2.3 电极的制备
        4.2.4 细胞培养及细胞固定
        4.2.5 CTS-Mn_3(PO_4)_2样品生物相容性研究(活/死染法)
        4.2.6 电子顺磁共振光谱分析(EPR)
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 CTS-Mn_3(PO_4)_2样品的物理表征及形成机理分析
        4.3.2 电化学测试和分析
        4.3.3 CTS-Mn_3(PO_4)_2样品的生物相容性
        4.3.4 细胞粘附在CTS-Mn_3(PO_4)_2样品上用于原位检测活细胞释放超氧负离子
        4.3.5 电子顺磁共振光谱(EPR)分析
    4.4 结论
第5章 类卷曲石墨烯状BC@DNA-Mn_3(PO_4)_2纳米酶用于超氧负离子的检测
    5.1 引言
    5.2 实验部分
        5.2.1 制备BC@DNA-Mn_3(PO_4)_2样品
        5.2.2 材料的物理表征
        5.2.3 电极的制备
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 BC@DNA-Mn_3(PO_4)_2样品的元素分析及物理表征
        5.3.2 电化学测试和分析
        5.3.3 CTS-Mn_3(PO_4)_2样品的生物相容性
        5.3.4 细胞在BC@DNA-Mn_3(PO_4)_2样品上的粘附生长
    5.4 结论
第6章 总结与展望
    6.1 全文总结
    6.2 展望
参考文献
致谢
硕士在读期间发表论文和学术交流情况



本文编号：3166430