采用不同种植技术构建组织工程软骨和组织工程骨的实验研究

发布时间：2021-05-11 09:02

　　目的：探讨采用更有效的细胞种植技术，体外构建组织工程软骨和组织工程骨，为进一步构建高质量的骨软骨复合组织块修复骨软骨组织缺损打下基础。方法：实验共分为二部分：第一部分：取一月龄新西兰兔六只，雌雄不限，体外分离、培养、扩增兔关节软骨细胞。分别通过纤维蛋白凝胶种植技术（实验组）及常规种植方法（对照组）将收获的兔第二代的软骨细胞以4×107/ml的细胞终浓度接种50μl于聚乳酸聚羟基乙酸聚合物支架（ PLGA:5mm×5mm×2mm）上。体外培养3周。3周后观察两组组织工程软骨的大小﹑形态﹑质地﹑光泽和组织弹性；HE染色法观察组织工程软骨细胞增殖及分布情况；甲苯胺蓝染色法观察氨基糖胺聚糖（GAG）的分泌及分布状况，并用1，9二甲基亚甲蓝法定量检测GAG的含量；采用Ⅱ型胶原免疫组织化学法观察Ⅱ型胶原的分泌，并用image-proplus6.0图象分析系统对Ⅱ型胶原染色面积行半定量分析；比色法测定组织工程软骨的DNA含量观察组织工程软骨的细胞增殖情况。第二部分：取一月龄新西兰兔六只，雌雄不限，体外分离、培养、扩增兔关节成骨细胞。分别通过负压接种技术（实验组）及常规种植方法（对照组）将收获的兔第二... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略语
中文摘要
英文摘要
前言
    参考文献
第一部分 采用纤维蛋白凝胶种植技术体外构建组织工程软骨的实验研究
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    小结
    参考文献
第二部分 采用负压吸引种植技术体外构建组织工程骨的实验研究
    引言
    材料与方法
    结果
    讨论
    小结
    参考文献
全文总结
综述与参考文献
    参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]正常人成骨细胞系的建立及鉴定[J]. 马文辉,张学敏,时述山,李亚非.  中国组织工程研究与临床康复. 2010(15)
[2]不同频率周期性压力对组织工程软骨的影响[J]. 张广程,范卫民,马益民,岳海涛,刘瑞平.  中华实验外科杂志. 2007(06)
[3]纤维蛋白凝胶种植技术在组织工程软骨体外构建中的应用[J]. 段小军,杨柳,周跃,陈光兴,李忠.  中国骨与关节损伤杂志. 2006(11)
[4]诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的体外研究[J]. 晏杰,刘玲蓉,张其清.  中国修复重建外科杂志. 2006(11)
[5]灌流-液压式反应器体外构建组织工程化软骨[J]. 吕晓杰,周广东,李宏,曹珲,刘霞,刘凯,崔磊,刘伟,曹谊林.  上海交通大学学报(医学版). 2006(09)
[6]周期性压力对组织工程软骨的影响及其作用机制[J]. 范卫民,蔡俊.  中华实验外科杂志. 2006(08)
[7]接种方式对细胞在三维材料中接种率和分布的影响[J]. 丁春梅,周燕,谭文松.  生物工程学报. 2005(04)
[8]应力环境下三维诱导组织工程种植细胞修复关节软骨缺损[J]. 吕昌伟,胡蕴玉,崔玉明,白健萍,廉凯.  中国矫形外科杂志. 2004(Z1)
[9]含锌煅烧牛松质骨复合骨髓基质细胞构建组织工程骨[J]. 郝杰,郑启新,郭晓东,刘苏南.  中华实验外科杂志. 2004(01)
[10]应用无支架离心管培养技术构建组织工程化关节软骨[J]. 杨志明,解慧琪,李胜富,孙爱民,王跃,钟亚玲,杨振琳.  中华骨科杂志. 2000(09)



本文编号：3181136