网纹藤壶胶蛋白的解析及其固化机理研究

发布时间：2021-06-07 18:38

　　海洋污损生物藤壶通过多种蛋白质为主的“藤壶胶”实现牢固的水下粘附。藤壶胶因良好的粘接性能及其所造成的严重污损问题而受到广泛关注。深入解析胶蛋白的特征、探究胶蛋白固化机制对阐释藤壶胶水下粘附机理,进而进行仿生粘合剂设计和针对性防污策略开发具有重要意义。本论文以我国海域普遍分布且无任何胶蛋白序列报道的网纹藤壶为研究对象,以多种方式从其固化胶中提取分离胶蛋白,并通过氨基酸测序和基于转录组数据库的质谱鉴定手段进行胶蛋白序列解析。此外,首次以基因序列已知的白脊藤壶19 kDa胶蛋白——Balcp19k为研究对象,探究了其在海水溶液中自组装形成淀粉样纤维的特性及其与固化的关系。本论文的主要工作及结论如下:通过硅橡胶基底实海挂板的方式成功采集到了网纹藤壶固化胶。采用高浓度变性剂体系、化学试剂裂解体系及淀粉样纤维解聚体系三种方式提取网纹藤壶胶蛋白。最终成功部分溶解了网纹藤壶,电泳检测表明至少提取到7个以上考染可见条带。通过基于公共数据库的串联质谱鉴定方式确认了溶解量最高、表观分子量40 kDa条带来自新蛋白。进一步通过液相色谱纯化该蛋白后进行氨基酸测序,但因N端封闭未能取得成功。为解决无基因组信息、低... 

【文章来源】：国防科技大学湖南省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

藤壶的生活周期藤壶的水下附着依赖“藤壶胶（Barnaclecement）”实现

国防科技大学研究生院硕士学位论文随后发生变态转变为典型的锥形成虫形态。附着后的藤壶整个生命周期中的生长捕食、交配等所有重要生命活动均在初始附着位点进行，甚至在死去后相当长的时间内其甲壳仍被藤壶胶牢牢贴附在基底上。1.2.1.2 藤壶胶合成与分泌典型的无柄藤壶成虫呈“锥形”，由底盘、侧壁、鳃盖等主要外壳保护其软组织主体[18]（图 1.2 A）。藤壶成虫的胶腺分布在其主体与底盘之间的结缔组织中，胶腺直接与分泌导管系统相连接，同一根导管上分布着处于不同发育阶段的幼年成熟和衰老的胶腺细胞[19]，如图 1.2 B 所示：

图 1.3 藤壶粘附强度测试装置通过测定恒定速度下水平剥离附着藤壶所需力的大小以及测量藤壶底着面积）计算出剥离藤壶所需的剪切强度也即藤壶在该种基底上附着的in 等采用该装置测定出剥离附着在聚甲基丙烯酸甲酯（polymethylmethaA）基底上藤壶所需的平均剪切强度为 0.5 MPa。Sangeetha[23]等采用类研究了 PMMA 基底上藤壶底盘直径对粘附强度的影响，结果如图 1.4 图 1.4 PMMA 基底上藤壶底盘直径对粘附强度的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]藤壶附着:从基底探测到胶的固化[J]. 张欣康,刘兴平,曾玲,叶宗煌,胡碧茹,吴文健.  生物化学与生物物理进展. 2017(03)
[2]中国沿海无柄蔓足类研究进展[J]. 严涛,黎祖福,胡煜峰,李鑫渲,曹文浩,罗文佳,程志强.  生态学报. 2012(16)
[3]环境温度对东方小藤壶（Chthamalus challengeri）生命表征的影响[J]. 铁镝,刘贵昌,刘晓军,季伟光.  海洋环境科学. 2010(02)



本文编号：3217092