含铜硫酸钙材料生物学性能及促血管和骨修复相关实验研究
发布时间：2021-06-13 07:05
研究目的血管生成在生物体内损伤修复起着重要的作用。已有动物实验证实硫酸铜能促进角膜血管生成。同时硫酸钙也能促进胫骨骨缺损周围血管形成。另外含铜生物陶瓷材料证实具备促成骨效应。于是本实验制备硫酸铜及硫酸钙复合材料,旨在验证复合材料理化表征及促血管和骨修复效应。方法1、含铜硫酸钙胶合剂的制备、物理表征及体外降解实验通过按照固定固液比例物理混合α-半水硫酸钙粉末和不同浓度的五水硫酸铜溶液,通过制模得到圆柱状含铜硫酸钙复合材料样品。检测材料表征及了解体外降解特性。2、含铜硫酸钙骨水泥对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）及骨髓间充质干细胞（BMSCs）增值分化、迁移的影响按照国际标准制备不同浓度复合材料浸提液,以浸提液干预HUVECs及BMSCs,通过CCK-8实验检测细胞增值能力;划痕实验及成管实验检测浸提液对HUVECs迁移和成管能力;PCR（Qrt-PCR）检测相关血管基因（VEGF/HIF-1α/eNOS）和相关成骨分化基因（OCN、ALP、RUNX2 及 BSP）表达;细胞免疫荧光检测相关蛋白（VEGF/HIF-1α）表达;茜素红染色检测浸提液对BMSCs矿化的影响。3、复合材料对大鼠胫...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：93 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１不同含铜量复合材料浸提液干预ＨＵＶＥＣｓ细胞的增殖情况??（ｘ士ｓ，ｎ＝５，＊表示与同一培养时间Ｃｕ?（０）组相比，有统计学意义Ｐ＜０．０５；?＃表示同一组??
?博士学位论文???ｓｅ＾ｏ－ｊ?ｓ？１００］??ｒｅ?？?？??Ｓ?Ｔ?Ｓ?８０－?Ａ－??丨?ｋｌｉｉ?ｉＬｎｉ??Ａ?Ｇｒｏｕｐ?ｂ?Ｇｒｏｕｐ??图２－３不同材料组浸提液干预后ＨＵＶＥＣｓ细胞的划痕愈合率??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３?（Ａ）?７＇ｈｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｒｅａ?ｗａｓ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ａｔ?Ｉ６ｈ．?Ｍｅａｎ??±?ＳＤ；?ｎ＝３．＾Ｐ＜０．０５?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?Ｃｕ（０）．（Ｂ）?Ｔｈｅ?ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｒｅａ??ｗａｓ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ａｔ?２４ｈ，?Ｍｅａｎ?土?ＳＤ；?ｎ＝３．?＊卩＜０．０５?Ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｔｏ?Ｃｕ（０），％Ｐ＜０．０５?Ｃｏｍｐａｒｅ?ｔｏ??Ｃｕ（Ｏ．ｌ）??３．４不同浓度铜掺杂硫酸钙对血管内皮细胞成管活力的结果??不同材料的浸提液对内皮细胞的成管活力测定如图２－４：结果表明：硫酸钙??及不同浓度含铜硫酸钙浸提液对内皮细胞都有不同程度的成管能力，但内皮细??胞在Ｃｕ（０．５）组材料浸提液溶解产物中孵育１２小时后形成细长的管状结构比其余??各组更完全及完整，内皮细胞在其余各组材料溶解产物形成不完全或零星的管??状结构，在Ｃ’ｕ（２．５）组最明显；所以成管能力Ｃｕ（０．５）最佳，Ｋ？次是Ｃｕ（Ｏ．ｌ）组、??Ｃｕ（ｌ）组、Ｃｕ（０）组，Ｃｕ（２．５）组最差。??Ｃｕ（０）?Ｃｕ（Ｏ．ｌ）?Ｃｕ（０．５）??＾＊ｖｖ；?ｊ：?＾??——■?－?４?—??＇＊ｒｌ??２９??
?第二部分不同浓度含铜硫酸钙对人脐静脉内皮细胞增殖分化及迁移的影响???Ｃｕ（ｌ）?Ｃｕ（２．５）??；？?？？Ｊ?ｐ?５?１?ｒ／－＇?ｒ．?＊?＼ｗ??攀．?＇■一?一??图２－４成管活力实验检测ＨＵＶＥＣｓ在不同浓度含铜硫酸钙浸提液中培养！２ｈ后的成管情况??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｓ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｉｏｎｉｃ?ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔ?ｏｆ?ｔｈｅ??ｆｉｖｅ?ｇｒｏｕｐｓ?ｏｆ?ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｔｕｂｕｌｅ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＨＵＶＥＣｓ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ?ｆｏｒ?１２ｈ??３．５?ＶＥＧＦ、出Ｆ－ｌ＜ｘ和ｅＭ）Ｓ的基因表达结果??图２－５中ＰＣＲ结果表明：在第４天，硫酸钙和含铜复合材料浸提液产物培养??基干预的ＨＵＶＥＣｓ孵育提取物中，ＶＥＧＦ和ＨＩＦ－ｌａ的基因表达随着复合材料中??铜含量的增加而增加。与Ｃｕ?（０）相比，Ｃｕ?（２．５）显著增加ＶＥＧＦ和ＨＩＦ－ｌａ??的表达２０倍以上，并且组间具有统计学差异。但ｅＮＯＳ表达的结果表明，材料??浸提液的溶解离子产物对基因的表达略有增强，但组间无明显统计学差异。在??一定程度上，我们可以得出结论，铜与硫酸钙的结合增强了它们促血管生成的??潜能。??ＶＥＧＦ?ＨＩＦ－１ａ?ｇ?４??Ｓ５０！?１?－ｒ??＞?ｉ－?ｉ３－??〇?３０－?°?〇??｜?丄?１３〇－?■?ｇ?２－?ｗｍ?＾??ｉ：ｉ：』ｌ?［ｌｉｉｎｌｉ??圣?〇?Ｉ?１?．??．?圣?〇＇?Ｉ??１?■
本文编号：3227244
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：93 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１不同含铜量复合材料浸提液干预ＨＵＶＥＣｓ细胞的增殖情况??（ｘ士ｓ，ｎ＝５，＊表示与同一培养时间Ｃｕ?（０）组相比，有统计学意义Ｐ＜０．０５；?＃表示同一组??
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