PRGD/PDLLA/β-TCP/NGF复合材料对PC12细胞分化相关基因的调控
发布时间：2021-07-02 14:55
大量研究表明神经导管中添加神经生长因子（NGF）组分能够明显促进受损神经的形态和功能恢复。用生物相容性良好,体内降解性能优异的材料作为基材复合神经生长因子是常用的缓释体系制备方法。本实验即利用自行设计的RGD接枝的聚（羟基乙酸-L-赖氨酸-乳酸）高分子材料,复合β-磷酸三钙、聚乳酸作为缓释基材,在有机溶剂中物理混合NGF冻干粉制得NGF缓释材料（PRGD/PDLLA/β-TCP/NGF）。本论文主要研究RGD复合材料缓释的NGF对PC12分化相关基因的调控。在体外实验中,分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定材料浸提液中NGF的含量,并通过用第1天浸提液诱导PC12细胞分化,测量PC12细胞最大直径、最长突起长度和突起数目来观察其形态学上的变化。研究结果显示：RGD复合材料中NGF的释放分为两个阶段—扩散阶段和降解阶段；材料在第1天出现NGF的暴释,第1天浸提液中NGF的浓度约为407.26ng/ml.将第1天浸提液稀释到100ng/ml NGF浓度处理PC12细胞3天,形态学结果显示细胞最大直径、最长突起长度和突起数目与对照组细胞存在明显统计学差异,出现明显分化。分别用第1天浸提液...
【文章来源】：武汉理工大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
神经生长因子NGF与神经导管复合的三种途径原理图
000」 02030却〕 〕 CCCyclesss图1一 3PCR扩增曲线 1.3.3DNA结合染料(SYBRGreenl) SYBRGreenl是荧光定量PCR最常见的DNA结合染料，与双链DNA(dsDNA)非特异性结合。在游离状态下， SYBRGreen工发出微弱的荧光，但一旦与dsDNA结合，其荧光增加 1000倍。所以，一个反应发出的全部荧光信号与出现的dsDNA量成比例，且会随扩增产物的增加而增加。DNA结合染料的优点包括:l)实验设计简单(仅需要2个引物，不需要设计探针);2)无需设计多个探针即可快速检验多个基因;3)低的初始成本(探针成本高);4)能够进行溶解曲线分析检验扩增反应的特异性。溶解曲线分析可以用来确定不同的反应产物
810121416Days图2一 1PRGD用DLLA/p一TCP加GF复合材料的NGF体外释放曲线Elisa实验结果显示(图2一l)，PRGD用DLL刀p一TCP加GF复合材料中NGF的释放主要集中在第1天，每毫克材料释放的NGF高达 13.57士 3.56ng。在此之后，NGF的释放逐渐趋于缓慢，第3天的浸提液中个，每毫克复合材料释放的l9
【参考文献】：
期刊论文
[1]实时荧光定量PCR技术的理论研究及其医学应用[J]. 刘小荣,张笠,王勇平. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(02)
[2]Evaluation of a Novel Bioabsorbable PRGD/PDLLA/β-TCP/NGF Composites in Repair of Peripheral Nerves[J]. 王永红,李世普. Journal of Wuhan University of Technology（Materials Science Edition）. 2009(03)
[3]NGF诱导PC12细胞神经元样细胞分化[J]. 张雯,张百芳,彭芳芳,武栋成. 江汉大学学报(自然科学版). 2008(03)
[4]受体酪氨酸激酶-Ras-MAPK信号转导途径研究进展[J]. 傅红. 国外医学(分子生物学分册). 1994(06)
博士论文
[1]钙离子通过调节Rho家族的鸟苷三磷酸酶触发神经元生长锥转向[D]. 金明.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院） 2005
硕士论文
[1]RGD复合材料神经生长因子缓释性能研究[D]. 万志涛.武汉理工大学 2009
本文编号：3260679
【文章来源】：武汉理工大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
神经生长因子NGF与神经导管复合的三种途径原理图
000」 02030却〕 〕 CCCyclesss图1一 3PCR扩增曲线 1.3.3DNA结合染料(SYBRGreenl) SYBRGreenl是荧光定量PCR最常见的DNA结合染料，与双链DNA(dsDNA)非特异性结合。在游离状态下， SYBRGreen工发出微弱的荧光，但一旦与dsDNA结合，其荧光增加 1000倍。所以，一个反应发出的全部荧光信号与出现的dsDNA量成比例，且会随扩增产物的增加而增加。DNA结合染料的优点包括:l)实验设计简单(仅需要2个引物，不需要设计探针);2)无需设计多个探针即可快速检验多个基因;3)低的初始成本(探针成本高);4)能够进行溶解曲线分析检验扩增反应的特异性。溶解曲线分析可以用来确定不同的反应产物
810121416Days图2一 1PRGD用DLLA/p一TCP加GF复合材料的NGF体外释放曲线Elisa实验结果显示(图2一l)，PRGD用DLL刀p一TCP加GF复合材料中NGF的释放主要集中在第1天，每毫克材料释放的NGF高达 13.57士 3.56ng。在此之后，NGF的释放逐渐趋于缓慢，第3天的浸提液中个，每毫克复合材料释放的l9
【参考文献】：
期刊论文
[1]实时荧光定量PCR技术的理论研究及其医学应用[J]. 刘小荣,张笠,王勇平. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(02)
[2]Evaluation of a Novel Bioabsorbable PRGD/PDLLA/β-TCP/NGF Composites in Repair of Peripheral Nerves[J]. 王永红,李世普. Journal of Wuhan University of Technology（Materials Science Edition）. 2009(03)
[3]NGF诱导PC12细胞神经元样细胞分化[J]. 张雯,张百芳,彭芳芳,武栋成. 江汉大学学报(自然科学版). 2008(03)
[4]受体酪氨酸激酶-Ras-MAPK信号转导途径研究进展[J]. 傅红. 国外医学(分子生物学分册). 1994(06)
博士论文
[1]钙离子通过调节Rho家族的鸟苷三磷酸酶触发神经元生长锥转向[D]. 金明.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院） 2005
硕士论文
[1]RGD复合材料神经生长因子缓释性能研究[D]. 万志涛.武汉理工大学 2009
本文编号：3260679
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/swyx/3260679.html
