适用于生物人工肝的微囊化肝细胞的大规模冻存研究
发布时间：2021-07-06 04:53
在我国,由病毒性肝炎及药物性肝损害导致的急性肝衰竭,其病情危急,死亡率很高。生物人工肝可以使患者过渡到肝移植或自身肝细胞再生,因此一直是当前研究的热点。而生物人工肝的开展,需要大量的肝细胞。因此,我们需要建立一个肝细胞库,从而源源不断地为生物人工肝提供足量的肝细胞。肝细胞冻存被认为是肝细胞长期储存的最理想也是唯一的方案。微囊化肝细胞不仅仅是填充灌流床式或流化床式生物人工肝的理想生物活性成分,同时也被认为是肝细胞冻存极为有前景的冻存方式。本研究的目的在于为海藻酸钠-壳聚糖微囊化原代猪肝细胞及可逆性人源性永生化肝细胞（HepLi4）的冻存,摸索出一个理想的微囊冻存方案。然后,在这一冻存条件下,开展海藻酸钠-壳聚糖微囊化原代猪肝细胞及可逆性人源性永生化肝细胞（HepLi4）的大规模冻存。本实验通过本实验室建立的Dispase-胶原酶四步灌流法分离获得原代猪肝细胞,而通过复苏及培养获得足量的可逆性人源性永生化肝细胞（HepLi4）。对两种肝细胞进行海藻酸钠-壳聚糖（AC）微囊化包裹,分别获取AC微囊化原代猪肝细胞及AC微囊化HepLi4细胞,并对两种微囊化肝细胞进行冻存,在液氮中冻存40天。其...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
组采用不同DMSO浓度冻存方案复苏的微囊化猪肝细胞的微囊完整性比较
(14.5873%士1.8228%)，而20%DMSO浓度组则以破损微囊多见(21.594%士1.4674%)。相对于以上两组，15%DMSO浓度组可获得最高的微囊规则性及完整性(96.484%士 1.3664%)，差异具有统计学意义(n=3，P<0.05)(图1一4)。微 微囊化猪肝细胞微囊完整性性 11100F一 一 9990卜胶葵篆翻王粉杰象别 ___燕燕80卜足澳燕翻嗓泰滋翔睡桑器安廷匆璐药滋瀚 瀚卞卞70卜卜瑟熙娜跪篆然瀚磁巍熟瀚眨兹}蒸兹泊 泊冲冲60卜胶簇缀绷麟嫩粼撇瀚绷麟裁溯 溯姚姚50卜膝裹熙翻陇滋澡抽滚摄摄翎滚裹鬓变拟 拟担担40卜一麟襄瑙麟麟到麟麟翻麟瀚溯 溯貂貂;l「黝黝黝黝黝 黝 1110卜谈姨恶浏姗淡渊欲菠簇到麟艇条溯赓滋澎翻翻 00000 555%10%15%20%25%%%冻 冻存组别 别图1一35组采用不同DMSO浓度冻存方案复苏的微囊化猪肝细胞的微囊完整性比较微囊化H即Li4细胞微囊完整性 nUCU︷11︸目曰八二nU八 UnU日一︸n曰曰八八 9OUOt才n匕民 4ddQg目，上﹃1.戴嘿尔阵担报翩冻存组别图1一43组采用不同DMso浓度冻存方案复苏的微囊化HePLi4细胞的微囊完整性比较
力(0.59302士0.032976)与20%DMSO组细胞的活力(0.61694士0.147792)相比接近，略高于10%DMSO组细胞的活力(0.4909士0.130186)，但差异不具有统计学意义(n=5，P>0.05)(图1一7)。微 微囊化HepLi4细胞活力 力 000.sr___冽冽 0.6r}暇服刻~膝襄燕瞬蒸翻 翻少少 0.4卜眺然缎粼缎匆麟然李乡蒸忿滋〕彩磁摧姗魏溯 溯叠叠“’‘!跳漱滋滋滋朔赚滋滋滋要彩溯贬彭彤毅滋滋翔 翔卜卜~.胶长长长长能澎穷长幻暇筋;召弓弓狡欢杯召多列不召召召召召召召么么汾 汾芝芝 0.2卜麟券毅群瀚到眺务务要彭漆渊瞪愁蒸遥然麟习 习 00000 1110%15%20%%%冻 冻存组别 别图1一73组采用不同DMsO浓度冻存方案复苏的微囊化HePLi4细胞的活力比较
本文编号：3267566
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
组采用不同DMSO浓度冻存方案复苏的微囊化猪肝细胞的微囊完整性比较
(14.5873%士1.8228%)，而20%DMSO浓度组则以破损微囊多见(21.594%士1.4674%)。相对于以上两组，15%DMSO浓度组可获得最高的微囊规则性及完整性(96.484%士 1.3664%)，差异具有统计学意义(n=3，P<0.05)(图1一4)。微 微囊化猪肝细胞微囊完整性性 11100F一 一 9990卜胶葵篆翻王粉杰象别 ___燕燕80卜足澳燕翻嗓泰滋翔睡桑器安廷匆璐药滋瀚 瀚卞卞70卜卜瑟熙娜跪篆然瀚磁巍熟瀚眨兹}蒸兹泊 泊冲冲60卜胶簇缀绷麟嫩粼撇瀚绷麟裁溯 溯姚姚50卜膝裹熙翻陇滋澡抽滚摄摄翎滚裹鬓变拟 拟担担40卜一麟襄瑙麟麟到麟麟翻麟瀚溯 溯貂貂;l「黝黝黝黝黝 黝 1110卜谈姨恶浏姗淡渊欲菠簇到麟艇条溯赓滋澎翻翻 00000 555%10%15%20%25%%%冻 冻存组别 别图1一35组采用不同DMSO浓度冻存方案复苏的微囊化猪肝细胞的微囊完整性比较微囊化H即Li4细胞微囊完整性 nUCU︷11︸目曰八二nU八 UnU日一︸n曰曰八八 9OUOt才n匕民 4ddQg目，上﹃1.戴嘿尔阵担报翩冻存组别图1一43组采用不同DMso浓度冻存方案复苏的微囊化HePLi4细胞的微囊完整性比较
力(0.59302士0.032976)与20%DMSO组细胞的活力(0.61694士0.147792)相比接近，略高于10%DMSO组细胞的活力(0.4909士0.130186)，但差异不具有统计学意义(n=5，P>0.05)(图1一7)。微 微囊化HepLi4细胞活力 力 000.sr___冽冽 0.6r}暇服刻~膝襄燕瞬蒸翻 翻少少 0.4卜眺然缎粼缎匆麟然李乡蒸忿滋〕彩磁摧姗魏溯 溯叠叠“’‘!跳漱滋滋滋朔赚滋滋滋要彩溯贬彭彤毅滋滋翔 翔卜卜~.胶长长长长能澎穷长幻暇筋;召弓弓狡欢杯召多列不召召召召召召召么么汾 汾芝芝 0.2卜麟券毅群瀚到眺务务要彭漆渊瞪愁蒸遥然麟习 习 00000 1110%15%20%%%冻 冻存组别 别图1一73组采用不同DMsO浓度冻存方案复苏的微囊化HePLi4细胞的活力比较
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