CBD-IKVAV-cRGD肽在选择性细胞滞留技术中的应用及机制研究
发布时间：2021-07-20 18:45
研究背景及目的:大段骨缺损的治疗是骨科临床面临的难题,其核心问题是难以获取足量的高活性骨修复材料。选择性细胞滞留技术（selective cell retention,SCR）是贴近临床的组织工程骨构建策略,提高MSCs与材料的粘附效率是提高SCR构建的骨移植物成骨活性的关键。脱钙骨基质（demineralized bone matrix,DBM）是临床常用的SCR富集材料,可通过增加额外粘附位点、正电荷或表面修饰减少孔径等途径来改善其与细胞的粘附和骨诱导能力。故我们设计了一个带胶原结合域（CBD）的含IKVAV-cRGD结构域的肽（CBD-IKVAV-cRGD）,修饰基于胶原的DBM,可发挥各自优势实现最大效能。该肽含多个整合素配体,分别与MSCs高表达的整合素亚型相结合,既能提高支架与细胞特异性粘附又可兼顾成骨诱导能力。方法:（1）选用兼顾MSCs特异性粘附和成骨诱导能力的IKVAV和cRGD肽,再选用可与DBM特异性结合的CBD,设计了CBD-IKVAV-cRGD和对照组CBD-IKVAV、CBD-cRGD肽的结构,并利用固态合成法及HPLC法等进行肽制备、纯化和验证,将三组肽修...
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
环境扫面电镜观察各肽对DBM的表观改性
图 2-2 环境扫面电镜观察各肽对 DBM 的表观改性2.2.3 CBD-IKVAV-cRGD 等肽修饰有效性和稳定性检测使用带 FITC 荧光标记各组肽修饰 DBM，以激光扫描显微镜进行三维重建，可见修饰所得的复合材料具有较强荧光，而未经修饰的空白 DBM 支架中检测不到荧光。而经高负荷的模拟 SCR 的操作后，各组修饰后复合材料仍带有较强荧光，进一步证明以单纯浸渍的方式可以较为稳定的修饰 DBM（图 2-3）。
A： MSCs 的形态 B：成骨诱导分化 C：成软骨诱导分化 D：成脂诱导图 3-1 间充质干细胞的多向分化鉴定2）MSCs 的流式鉴定流式细胞术鉴定，课题组实验所用MSCs的阳性标记均在97%以上，阴性以下，符合国际细胞治疗协会制定的基础鉴定标准[21]。
本文编号：3293376
【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
环境扫面电镜观察各肽对DBM的表观改性
图 2-2 环境扫面电镜观察各肽对 DBM 的表观改性2.2.3 CBD-IKVAV-cRGD 等肽修饰有效性和稳定性检测使用带 FITC 荧光标记各组肽修饰 DBM，以激光扫描显微镜进行三维重建，可见修饰所得的复合材料具有较强荧光，而未经修饰的空白 DBM 支架中检测不到荧光。而经高负荷的模拟 SCR 的操作后，各组修饰后复合材料仍带有较强荧光，进一步证明以单纯浸渍的方式可以较为稳定的修饰 DBM（图 2-3）。
A： MSCs 的形态 B：成骨诱导分化 C：成软骨诱导分化 D：成脂诱导图 3-1 间充质干细胞的多向分化鉴定2）MSCs 的流式鉴定流式细胞术鉴定，课题组实验所用MSCs的阳性标记均在97%以上，阴性以下，符合国际细胞治疗协会制定的基础鉴定标准[21]。
本文编号：3293376
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