毛囊干细胞与异种膀胱脱细胞基质生物相容性研究
发布时间:2017-04-27 18:01
本文关键词:毛囊干细胞与异种膀胱脱细胞基质生物相容性研究,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:通过构建毛囊干细胞(Hair follicle stem cells,HFSCs)与异种膀胱脱细胞基质(bladder acellular matrix, BAM)为支架的细胞支架复合物,观察细胞支架复合物的体外生物相容性,为HFSCs和异种BAM复合物修复膀胱缺损的研究提供前期的实验基础。方法:联合应用显微分离法、二步酶法及差速贴壁法获取大鼠HFSCs,倒置显微镜下观察细胞形态特征,表面标志物CK15、β1整合素及CD34联合用于鉴定;制备新西兰兔BAM,通过扫描电镜和Masson染色检测材料脱细胞效果,采用二次沉淀法将P3代HFSCs静态接种于BAM表面,倒置显微镜下观察细胞生长状态,并绘制细胞生长曲线,组织学检测和扫描电镜观察细胞在材料表面的生长状况。结果:纯化的HFSCs集落呈典型的“铺路石状”,CK15角质蛋白抗体免疫荧光染色呈阳性表达,流式细胞仪检测PE标记的CD34呈较高表达,FITC标记的β1整合素成高表达。制备的BAM为白色半透明膜状,扫描电镜下观察为纤维网状结构,未见细胞残留。Masson染色提示BAM为胶原结构,无明显细胞残留,细胞毒性检测表明材料无细胞毒性。细胞材料体外复合培养48h后倒置显微镜下观察BAM周围HFSCs生长状态良好,HFSCs-BAM材料上细胞生长曲线与对照组类似,7-8天左右进入生长平台期,扫描电镜下观察HFSCs伸展、粘附于BAM支架表面。体外复合培养1周行组织学检测,可见1~3层细胞铺于支架材料表面。结论:HFSCs与异种BAM有良好的生物相容性,进一步为HFSCs修复膀胱缺损疾病的研究奠定了基础。
【关键词】:毛囊干细胞 膀胱脱细胞基质 支架 相容性 修复
【学位授予单位】:新疆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R318.08
【目录】:
- 摘要7-8
- Abstract8-10
- 前言10-13
- 内容与方法13-23
- 1. 实验材料13-15
- 2. 毛囊干细胞培养及鉴定及增殖实验15-17
- 3. 兔膀胱脱细胞基质的制备及鉴定17-20
- 4. 毛囊干细胞与膀胱脱细胞基质体外生物相容性的研究20-22
- 5. 技术路线图22-23
- 结果23-30
- 讨论30-39
- 小结39-40
- 致谢40-41
- 参考文献41-47
- 综述47-54
- 参考文献51-54
- 攻读硕士学位期间发表的学位论文54-55
- 导师评阅表55
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前7条
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本文关键词:毛囊干细胞与异种膀胱脱细胞基质生物相容性研究,由笔耕文化传播整理发布。
本文编号:331115
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