响应面法降低肝细胞冷冻保护液中的二甲基亚砜浓度
发布时间:2021-08-19 23:17
为有效降低干细胞冷冻保护液中的二甲基亚砜(Me2SO,DMSO)浓度,减少其作为冷冻保护剂对细胞低温保存时产生的毒性,提高细胞存活率,以肝细胞为目标,采取响应面法对冷冻保护剂配方进行了优化。结果表明:冷冻保护剂的最佳配比为DMSO浓度3%、甘油浓度6%、海藻糖浓度0.1%,在此条件下肝细胞复温存活率可达到84.35%,研究结果有效地降低了DMSO的浓度,减少了由此带来的对肝细胞造成的毒性损害,为后续的研究奠定了基础。
【文章来源】:生物技术进展. 2020,10(02)
【文章页数】:5 页
【部分图文】:
DMSO和甘油浓度对肝细胞复活率影响的响应面图及等高线图
DMSO和海藻糖浓度对肝细胞复活率影响的响应面图及等高线图
图2 DMSO和海藻糖浓度对肝细胞复活率影响的响应面图及等高线图本实验提供了细胞外DMSO的合适浓度,但由于DMSO是一种渗透性保护剂,至于冻存之后在细胞内产生了多少DMSO的残留,还需要进一步的实验进行确定;其次,有关于海藻糖的浓度是否还有细化的空间也需进一步探究。在之前实验过程中发现,大于0.3%浓度的海藻糖会由于保护液的渗透压太大,从而在冻存前使肝细胞全部死亡,因此对海藻糖的浓度有待更深层次的研究。最后,希望通过本实验结果,能够提示在其他类别的细胞冻存中也降低DMSO毒性的危害,同时积极去寻找新型的无毒保护剂,来逐步替代毒性保护剂。
【参考文献】:
期刊论文
[1]DMSO与DMF对H9C2心肌细胞毒性及STAT3信号通路的影响[J]. 杨敏,张凯,李建喜,王磊,张康,仇正英,王学智. 浙江农业学报. 2019(09)
[2]二甲基甲酰胺致H9c2心肌细胞炎性损伤研究[J]. 荣青秀,杨永坚,张婉婉,马晓丽,向梅,王璐璐,孙文静. 中国职业医学. 2017(01)
[3]二甲基亚砜(DMSO)对骨髓瘤细胞RPMI8226影响的研究[J]. 李俊东,裴晓川,白春强,张媛媛,张志华,闫丽娜,李红,郝长来. 吉林医学. 2017(01)
[4]响应面法在试验设计与优化中的应用[J]. 李莉,张赛,何强,胡学斌. 实验室研究与探索. 2015(08)
[5]对二甲基亚砜在小鼠淋巴瘤细胞实验中适宜浓度的探索[J]. 胡燕平,文海若,宋捷,左泽平,许雷鸣. 中国新药杂志. 2015(02)
[6]南瓜籽粕酶法制备血管紧张素转化酶抑制肽工艺优化[J]. 周红丽,谭兴和,刘志伟,李清明. 农业工程学报. 2015(S1)
[7]二甲基亚砜诱导小鼠红白血病细胞分化的差异蛋白质组学[J]. 杨祖立,朱晓芳,施鸣铭,胡繁,赵辅昆,张世馥. 解剖学报. 2014(04)
[8]DMSO诱导MCF-7细胞凋亡的研究[J]. 扎拉嘎胡,陈莉,买霞,陈小义. 解剖科学进展. 2008(01)
[9]不同浓度DMSO对胃癌细胞生长的影响[J]. 张卫国,史雪勤,王小虎,谢国建,李胜保,吴清明. 重庆医学. 2004(11)
[10]二甲基亚砜对培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响[J]. 彭坤,邢怡桥,项奕,叶美红,艾明,杨安怀,杨燕宁. 眼科新进展. 2004(02)
本文编号:3352323
【文章来源】:生物技术进展. 2020,10(02)
【文章页数】:5 页
【部分图文】:
DMSO和甘油浓度对肝细胞复活率影响的响应面图及等高线图
DMSO和海藻糖浓度对肝细胞复活率影响的响应面图及等高线图
图2 DMSO和海藻糖浓度对肝细胞复活率影响的响应面图及等高线图本实验提供了细胞外DMSO的合适浓度,但由于DMSO是一种渗透性保护剂,至于冻存之后在细胞内产生了多少DMSO的残留,还需要进一步的实验进行确定;其次,有关于海藻糖的浓度是否还有细化的空间也需进一步探究。在之前实验过程中发现,大于0.3%浓度的海藻糖会由于保护液的渗透压太大,从而在冻存前使肝细胞全部死亡,因此对海藻糖的浓度有待更深层次的研究。最后,希望通过本实验结果,能够提示在其他类别的细胞冻存中也降低DMSO毒性的危害,同时积极去寻找新型的无毒保护剂,来逐步替代毒性保护剂。
【参考文献】:
期刊论文
[1]DMSO与DMF对H9C2心肌细胞毒性及STAT3信号通路的影响[J]. 杨敏,张凯,李建喜,王磊,张康,仇正英,王学智. 浙江农业学报. 2019(09)
[2]二甲基甲酰胺致H9c2心肌细胞炎性损伤研究[J]. 荣青秀,杨永坚,张婉婉,马晓丽,向梅,王璐璐,孙文静. 中国职业医学. 2017(01)
[3]二甲基亚砜(DMSO)对骨髓瘤细胞RPMI8226影响的研究[J]. 李俊东,裴晓川,白春强,张媛媛,张志华,闫丽娜,李红,郝长来. 吉林医学. 2017(01)
[4]响应面法在试验设计与优化中的应用[J]. 李莉,张赛,何强,胡学斌. 实验室研究与探索. 2015(08)
[5]对二甲基亚砜在小鼠淋巴瘤细胞实验中适宜浓度的探索[J]. 胡燕平,文海若,宋捷,左泽平,许雷鸣. 中国新药杂志. 2015(02)
[6]南瓜籽粕酶法制备血管紧张素转化酶抑制肽工艺优化[J]. 周红丽,谭兴和,刘志伟,李清明. 农业工程学报. 2015(S1)
[7]二甲基亚砜诱导小鼠红白血病细胞分化的差异蛋白质组学[J]. 杨祖立,朱晓芳,施鸣铭,胡繁,赵辅昆,张世馥. 解剖学报. 2014(04)
[8]DMSO诱导MCF-7细胞凋亡的研究[J]. 扎拉嘎胡,陈莉,买霞,陈小义. 解剖科学进展. 2008(01)
[9]不同浓度DMSO对胃癌细胞生长的影响[J]. 张卫国,史雪勤,王小虎,谢国建,李胜保,吴清明. 重庆医学. 2004(11)
[10]二甲基亚砜对培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响[J]. 彭坤,邢怡桥,项奕,叶美红,艾明,杨安怀,杨燕宁. 眼科新进展. 2004(02)
本文编号:3352323
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/swyx/3352323.html