骨髓间充质干细胞诱导的内皮样细胞与细胞膜片混合培养

发布时间：2021-09-09 05:53

　　目的:（1）探索通过将骨髓间充质干细胞诱导所得内皮样细胞与骨髓间充质干细胞制备的细胞片混合培养,初步探讨两者共同培养体外血管形成的可行性。（2）同时并将混合培养后的细胞片运用于完全游离的缺血皮瓣模型,评估体内血管形成的潜能。方法:（1）骨髓间充质细胞（BMSCs）提取、培养及流式鉴定:取SPF级4周龄雄性SD大鼠,处死后提取骨髓冲洗液,采用全骨髓差异贴壁培养法,体外培养大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）,取培养所得P4代BMSC,胰酶消化后运用流式细胞计数检测表面标记物CD90、CD73、CD11b、CD45、CD31。（2）抗坏血酸介导BMSC形成细胞片:取培养所得P4代BMSC,加入含有抗坏血酸的培养基中培养10天后形成可通过细胞刮刮取的片状结构,分别加入成骨、成脂诱导培养基进行分化功能鉴定,并通过CCK8法检测、绘制加入与不加入抗坏血酸后的BMSCs生长曲线;行HE、Masson染色观察细胞片组织学结构。（3）BMSC向内皮样细胞诱导及鉴定:采用含有血管内皮细胞生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（b-FGF）合诱导因子方法将骨髓间充质干细胞诱导分化为内皮样细胞,观察细胞形... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

原代BMSC第3天（100×）

原代BMSC第7天（100×）

cP3代BMSC第3天（100×）


本文编号：3391554