软刻蚀方法制备细胞模板及内皮/平滑肌细胞的协同培养
发布时间：2021-09-18 05:51
生物材料表面内膜功能及完整性的恢复是解决心血管系统植入装置血栓与栓塞并发症、提高远期的管腔通畅率的最佳方法之一。借鉴仿生表面工程的设计理念,本文采用微转移模塑方法在NaOH活化的钛（TiOH）表面成功制备出了透明质酸（HA）微图形,采用扫描电子显微镜（SEM）、傅里叶红外变换光谱分析（FTIR）、接触角测量仪、表面轮廓仪和电子能谱仪（EDX）对制备HA微图形及其稳定性进行了表征,进而研究了HA的抗细胞粘附功能,并利用酶联免疫吸附实验（Elisa）和细胞粘附实验研究了透明质酸酶（HAa）对HA的酶解作用,以及纤维连接蛋白（FN）和Ⅳ型胶原蛋白（CollagenⅣ）关闭HA的抗蛋白、抗细胞粘附功能。在此基础上,作为细胞模板用于研究对血小板、内皮细胞、平滑肌细胞粘附的影响,以及在细胞模板上血小板/内皮细胞、内皮/平滑肌细胞联合培养的研究。SEM、FTIR和接触角测量结果表明：碱活化后钛（Ti）表面形貌和粗糙度发生改变,出现-OH伸缩振动峰,其亲水程度明显增加；SEM和表面轮廓仪检测结果表明：采用浇铸法制备出沟、脊分明、表面平整的PDMS弹性印章；SEM和EDX检测结果表明：采用软刻蚀（微转移...
【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
血管组织结构示意图
西南交通大学硕士研究生学位论文第3页原凝胶上种植内皮细胞〔绷12’〕〔哭2(见图1一ZB);③直接在平滑肌细胞上种植内皮细胞[23][24][2v](见图1一ZC);④两种细胞混合培养的联合培养模式125]I26](见图1一ZD)。①、④多用于研究两种细胞的交互作用，方法②、③适用于组织工程血管假体的研究[27〕[28J。A任cmono一a丫e了Memb犷aneSMC滚yer ECmon。}ayerSMC川 eo}}agenge】C任cmonolayerSMC翻yerSUbstra掩Sobstrate~~~~~呻卜三图1一2内皮评滑肌细胞联合培养模型[32]目前发展的凡种联合培养模型都有自己的优缺点，如常用多孔PET薄膜两侧分别种植内皮细胞和平滑肌细胞的方法可以方便地分离两种细胞，是研究细胞之间各种水溶性信号转导较好的模型四，但由于PET作为一种隔离层阻碍了两种细胞之间物理接触[30]，并且引入的隔离层是一种致密材料，会对细胞的功能产生影响[3’〕。在含有平滑肌细胞的胶原凝胶上种植内皮细胞的方法较接近生理状态，但内皮细胞容易往胶原层迁移，使得该模型不稳定[32]。内皮细胞直接种植在平滑肌细胞上的方法是目前仿生最好的模型
将印章盖在基底表面，施加一定的力，使得印章突起的部分与基底紧密接触，随后轻轻地揭开印章，就得到了图案化的分子膜表面，微接触印刷方法操作简捷有效，适合在金、聚乙二醇修饰的玻璃和二氧化硅表面制作微图形[57]。其操作过程如图1一5所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]新型PDMS弹性印章的制备方法及其在纳米生物芯片中的应用[J]. 夏骏,陈翔,高峰,彭志海. 中国现代医学杂志. 2010(05)
[2]PDMS表面修饰方法的研究进展[J]. 郑小林,张瑞强,杨军,金庆辉,许蓉,赵建龙. 材料导报. 2009(15)
[3]二维平面细胞微图案化技术及其生物学应用[J]. 刘文文,陈振玲,蒋兴宇. 分析化学. 2009(07)
[4]纳流控芯片的微加工技术及其应用[J]. 何巧红,陈双. 化学进展. 2008(12)
[5]透明质酸衍生物研究进展[J]. 金艳,凌沛学,张天民. 中国生化药物杂志. 2008(06)
[6]接触角测量技术的应用[J]. 丁晓峰,陈沛智,管蓉. 分析试验室. 2008(S1)
[7]纯钛金属种植体表面活性化的处理方法[J]. 吴应龙,梁剑秋,刘族志. 中国组织工程研究与临床康复. 2008(14)
[8]原子力显微镜对透明质酸分形结构的研究[J]. 王书红,马豫峰,蔡继业. 高分子材料科学与工程. 2007(03)
[9]透明质酸的降解方法及工艺条件研究[J]. 覃彩凤,王淼,陈晓峰. 食品科技. 2007(04)
[10]一种改进的人脐静脉内皮细胞的培养方法[J]. 李琴山,冯赞杰,刘洋,徐海燕,钱民章. 第四军医大学学报. 2007(03)
博士论文
[1]软刻蚀技术在高分子科学中的应用[D]. 石锦霞.中国科学技术大学 2008
[2]以脱细胞犬动脉为基质的新型组织工程血管支架的制备和体外再细胞化研究[D]. 涂秋芬.四川大学 2007
硕士论文
[1]纯钛表面细胞外基质制备及其生物相容性研究[D]. 薛小青.西南交通大学 2010
[2]软刻蚀方法制备壳聚糖/牛血清白蛋白复合微图形及其相关性质研究[D]. 谢佳.西南交通大学 2010
[3]利用自组装技术在钛表面定向固定CD34抗体及其内皮化诱导研究[D]. 陈诚.西南交通大学 2009
本文编号：3399596
【文章来源】：西南交通大学四川省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
血管组织结构示意图
西南交通大学硕士研究生学位论文第3页原凝胶上种植内皮细胞〔绷12’〕〔哭2(见图1一ZB);③直接在平滑肌细胞上种植内皮细胞[23][24][2v](见图1一ZC);④两种细胞混合培养的联合培养模式125]I26](见图1一ZD)。①、④多用于研究两种细胞的交互作用，方法②、③适用于组织工程血管假体的研究[27〕[28J。A任cmono一a丫e了Memb犷aneSMC滚yer ECmon。}ayerSMC川 eo}}agenge】C任cmonolayerSMC翻yerSUbstra掩Sobstrate~~~~~呻卜三图1一2内皮评滑肌细胞联合培养模型[32]目前发展的凡种联合培养模型都有自己的优缺点，如常用多孔PET薄膜两侧分别种植内皮细胞和平滑肌细胞的方法可以方便地分离两种细胞，是研究细胞之间各种水溶性信号转导较好的模型四，但由于PET作为一种隔离层阻碍了两种细胞之间物理接触[30]，并且引入的隔离层是一种致密材料，会对细胞的功能产生影响[3’〕。在含有平滑肌细胞的胶原凝胶上种植内皮细胞的方法较接近生理状态，但内皮细胞容易往胶原层迁移，使得该模型不稳定[32]。内皮细胞直接种植在平滑肌细胞上的方法是目前仿生最好的模型
将印章盖在基底表面，施加一定的力，使得印章突起的部分与基底紧密接触，随后轻轻地揭开印章，就得到了图案化的分子膜表面，微接触印刷方法操作简捷有效，适合在金、聚乙二醇修饰的玻璃和二氧化硅表面制作微图形[57]。其操作过程如图1一5所示。
【参考文献】：
期刊论文
[1]新型PDMS弹性印章的制备方法及其在纳米生物芯片中的应用[J]. 夏骏,陈翔,高峰,彭志海. 中国现代医学杂志. 2010(05)
[2]PDMS表面修饰方法的研究进展[J]. 郑小林,张瑞强,杨军,金庆辉,许蓉,赵建龙. 材料导报. 2009(15)
[3]二维平面细胞微图案化技术及其生物学应用[J]. 刘文文,陈振玲,蒋兴宇. 分析化学. 2009(07)
[4]纳流控芯片的微加工技术及其应用[J]. 何巧红,陈双. 化学进展. 2008(12)
[5]透明质酸衍生物研究进展[J]. 金艳,凌沛学,张天民. 中国生化药物杂志. 2008(06)
[6]接触角测量技术的应用[J]. 丁晓峰,陈沛智,管蓉. 分析试验室. 2008(S1)
[7]纯钛金属种植体表面活性化的处理方法[J]. 吴应龙,梁剑秋,刘族志. 中国组织工程研究与临床康复. 2008(14)
[8]原子力显微镜对透明质酸分形结构的研究[J]. 王书红,马豫峰,蔡继业. 高分子材料科学与工程. 2007(03)
[9]透明质酸的降解方法及工艺条件研究[J]. 覃彩凤,王淼,陈晓峰. 食品科技. 2007(04)
[10]一种改进的人脐静脉内皮细胞的培养方法[J]. 李琴山,冯赞杰,刘洋,徐海燕,钱民章. 第四军医大学学报. 2007(03)
博士论文
[1]软刻蚀技术在高分子科学中的应用[D]. 石锦霞.中国科学技术大学 2008
[2]以脱细胞犬动脉为基质的新型组织工程血管支架的制备和体外再细胞化研究[D]. 涂秋芬.四川大学 2007
硕士论文
[1]纯钛表面细胞外基质制备及其生物相容性研究[D]. 薛小青.西南交通大学 2010
[2]软刻蚀方法制备壳聚糖/牛血清白蛋白复合微图形及其相关性质研究[D]. 谢佳.西南交通大学 2010
[3]利用自组装技术在钛表面定向固定CD34抗体及其内皮化诱导研究[D]. 陈诚.西南交通大学 2009
本文编号：3399596
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