壳聚糖微球/小牛松质骨支架复合缓释体系的制备及体外生物活性评价
发布时间：2021-10-11 05:20
目的:通过乳液交联法合成壳聚糖微球并负载骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）,再将其复合于脱细胞基质的小牛松质骨支架,制备壳聚糖微球/小牛松质骨支架复合缓释体系。方法:使用红外光谱仪、扫描电镜对合成的复合缓释系统进行结构表征和形貌观察,并对微球的包封率和载药量进行检测。用动态浸泡的方法来检测BMP-2的体外释放特征,通过体外检测复合体系的细胞毒性和对细胞增殖的影响。结果:壳聚糖发生了交联并成功包载了BMP-2,微球平均直径为5.982μm,表面光滑,且成功负载于小牛松质骨支架,形成了新型的微球/支架药物缓释体系。缓释数据表明,5 mg微球在体外释放21 d,BMP-2逐渐释放,第21天时浓度仍达到（239.1±20.0）mg/L。体外测试表明,该缓释体系有利于小鼠前成骨细胞MC3T3-E1的生长,促进向成骨方向分化。结论:壳聚糖微球/小牛松质骨支架复合缓释体系实现了BMP-2的生物学功能及其在骨修复部位的持续、缓慢释放,为骨组织缺损的修复治疗及骨组织工程支架材料的选择提供了依据。
【文章来源】：北京大学学报(医学版). 2016,48(06)北大核心CSCD
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
乳化交联法制备CS/BMP-2微球的装置示意图
ⅰ狢H2、—CH3的伸缩振动峰以及C—O的特征峰。与其相比，b曲线(即CS微球)产生了新特征峰，1667．00/cm处代表C?O伸缩振动峰出现，表明香草醛的羰基基团连接到CS的氨基位点上，且1643．00/cm处出现的C?N振动峰说明CS与香草醛发生了交联反应，产生了席夫碱(Schiffbase)。c曲线(BMP-2)的特征峰也相应在d曲线(即CS/BMP-2)的FT-IＲ图谱上，3435．34/cm处的—OH伸缩振动峰移至3230．18/cm，说明复合体中的分子内和分子间的氢键作用加强。a，CSmaterial;b，CSmicrospheres;c，BMP-2;d，CS/BMP-2micro-spheres．图2缓释材料的红外图谱Figure2Fouriertransforminfraredofmaterials2．2材料形貌观察CS/BMP-2微球的形状及表面形态如图3所示，图3A和B分别表示在不同放大倍数下观察的CS/BMP-2微球。利用乳化交联法制备的微球呈现出很好的球形，整个球体表面光滑，应用扫描电镜测量所制备微球的平均直径为5．982μm。从图4A中可以看出，采用扫描电镜观察所制备的CBB多孔支架材料的内部具有明显的多孔结构，孔径约为300pm至500μm，且具有一定的定向性。大孔之间通过小孔连接，具有较好的连通性。当负载微球后，由于胶原包裹到微球并使其粘附在CBB多孔支架上，使得CBB的孔径得以填充，从图4B中可以看出复合缓释体的孔隙率明显减小，孔径为50～70μm，说明CBB支架成功负载了CS微球。2．3包载率和包封率测定CS/BMP-2微球的包载率和包封率如表2所示，随着BMP-2含量的增加，CS/BMP-2的包载率增加，但是包封率却在下降，这说明BMP-2能被成功包载于微球中。2．4CS/BMP-2微球的体外缓释实验合成的CS/BMP-2微球中，BMP-2的含量约为(1．80±0．17)mg/g。采用动态浸泡的方法检测第1、3、5、7、10、14和21天缓释液中BMP-2的含量，B
匫伸缩振动峰出现，表明香草醛的羰基基团连接到CS的氨基位点上，且1643．00/cm处出现的C?N振动峰说明CS与香草醛发生了交联反应，产生了席夫碱(Schiffbase)。c曲线(BMP-2)的特征峰也相应在d曲线(即CS/BMP-2)的FT-IＲ图谱上，3435．34/cm处的—OH伸缩振动峰移至3230．18/cm，说明复合体中的分子内和分子间的氢键作用加强。a，CSmaterial;b，CSmicrospheres;c，BMP-2;d，CS/BMP-2micro-spheres．图2缓释材料的红外图谱Figure2Fouriertransforminfraredofmaterials2．2材料形貌观察CS/BMP-2微球的形状及表面形态如图3所示，图3A和B分别表示在不同放大倍数下观察的CS/BMP-2微球。利用乳化交联法制备的微球呈现出很好的球形，整个球体表面光滑，应用扫描电镜测量所制备微球的平均直径为5．982μm。从图4A中可以看出，采用扫描电镜观察所制备的CBB多孔支架材料的内部具有明显的多孔结构，孔径约为300pm至500μm，且具有一定的定向性。大孔之间通过小孔连接，具有较好的连通性。当负载微球后，由于胶原包裹到微球并使其粘附在CBB多孔支架上，使得CBB的孔径得以填充，从图4B中可以看出复合缓释体的孔隙率明显减小，孔径为50～70μm，说明CBB支架成功负载了CS微球。2．3包载率和包封率测定CS/BMP-2微球的包载率和包封率如表2所示，随着BMP-2含量的增加，CS/BMP-2的包载率增加，但是包封率却在下降，这说明BMP-2能被成功包载于微球中。2．4CS/BMP-2微球的体外缓释实验合成的CS/BMP-2微球中，BMP-2的含量约为(1．80±0．17)mg/g。采用动态浸泡的方法检测第1、3、5、7、10、14和21天缓释液中BMP-2的含量，BMP-2的释放速度随着时间的延长逐渐下降，第1天测得的缓释液中BMP-2的含量达15%，呈现突释效应，第21天测得的缓释液中BM
本文编号：3429866
【文章来源】：北京大学学报(医学版). 2016,48(06)北大核心CSCD
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【部分图文】：
乳化交联法制备CS/BMP-2微球的装置示意图
ⅰ狢H2、—CH3的伸缩振动峰以及C—O的特征峰。与其相比，b曲线(即CS微球)产生了新特征峰，1667．00/cm处代表C?O伸缩振动峰出现，表明香草醛的羰基基团连接到CS的氨基位点上，且1643．00/cm处出现的C?N振动峰说明CS与香草醛发生了交联反应，产生了席夫碱(Schiffbase)。c曲线(BMP-2)的特征峰也相应在d曲线(即CS/BMP-2)的FT-IＲ图谱上，3435．34/cm处的—OH伸缩振动峰移至3230．18/cm，说明复合体中的分子内和分子间的氢键作用加强。a，CSmaterial;b，CSmicrospheres;c，BMP-2;d，CS/BMP-2micro-spheres．图2缓释材料的红外图谱Figure2Fouriertransforminfraredofmaterials2．2材料形貌观察CS/BMP-2微球的形状及表面形态如图3所示，图3A和B分别表示在不同放大倍数下观察的CS/BMP-2微球。利用乳化交联法制备的微球呈现出很好的球形，整个球体表面光滑，应用扫描电镜测量所制备微球的平均直径为5．982μm。从图4A中可以看出，采用扫描电镜观察所制备的CBB多孔支架材料的内部具有明显的多孔结构，孔径约为300pm至500μm，且具有一定的定向性。大孔之间通过小孔连接，具有较好的连通性。当负载微球后，由于胶原包裹到微球并使其粘附在CBB多孔支架上，使得CBB的孔径得以填充，从图4B中可以看出复合缓释体的孔隙率明显减小，孔径为50～70μm，说明CBB支架成功负载了CS微球。2．3包载率和包封率测定CS/BMP-2微球的包载率和包封率如表2所示，随着BMP-2含量的增加，CS/BMP-2的包载率增加，但是包封率却在下降，这说明BMP-2能被成功包载于微球中。2．4CS/BMP-2微球的体外缓释实验合成的CS/BMP-2微球中，BMP-2的含量约为(1．80±0．17)mg/g。采用动态浸泡的方法检测第1、3、5、7、10、14和21天缓释液中BMP-2的含量，B
匫伸缩振动峰出现，表明香草醛的羰基基团连接到CS的氨基位点上，且1643．00/cm处出现的C?N振动峰说明CS与香草醛发生了交联反应，产生了席夫碱(Schiffbase)。c曲线(BMP-2)的特征峰也相应在d曲线(即CS/BMP-2)的FT-IＲ图谱上，3435．34/cm处的—OH伸缩振动峰移至3230．18/cm，说明复合体中的分子内和分子间的氢键作用加强。a，CSmaterial;b，CSmicrospheres;c，BMP-2;d，CS/BMP-2micro-spheres．图2缓释材料的红外图谱Figure2Fouriertransforminfraredofmaterials2．2材料形貌观察CS/BMP-2微球的形状及表面形态如图3所示，图3A和B分别表示在不同放大倍数下观察的CS/BMP-2微球。利用乳化交联法制备的微球呈现出很好的球形，整个球体表面光滑，应用扫描电镜测量所制备微球的平均直径为5．982μm。从图4A中可以看出，采用扫描电镜观察所制备的CBB多孔支架材料的内部具有明显的多孔结构，孔径约为300pm至500μm，且具有一定的定向性。大孔之间通过小孔连接，具有较好的连通性。当负载微球后，由于胶原包裹到微球并使其粘附在CBB多孔支架上，使得CBB的孔径得以填充，从图4B中可以看出复合缓释体的孔隙率明显减小，孔径为50～70μm，说明CBB支架成功负载了CS微球。2．3包载率和包封率测定CS/BMP-2微球的包载率和包封率如表2所示，随着BMP-2含量的增加，CS/BMP-2的包载率增加，但是包封率却在下降，这说明BMP-2能被成功包载于微球中。2．4CS/BMP-2微球的体外缓释实验合成的CS/BMP-2微球中，BMP-2的含量约为(1．80±0．17)mg/g。采用动态浸泡的方法检测第1、3、5、7、10、14和21天缓释液中BMP-2的含量，BMP-2的释放速度随着时间的延长逐渐下降，第1天测得的缓释液中BMP-2的含量达15%，呈现突释效应，第21天测得的缓释液中BM
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