脂肪间充质干细胞膜片复合仿生多孔磷酸三钙(β-TCP)/I型胶原(COL-I)支架的成骨研究
发布时间:2021-10-24 17:17
目的:体外培养脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs),了解其生物学特性,探索脂肪间充质干细胞膜片的构建方法,及其与仿生多孔磷酸三钙(β-TCP)/Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)支架所构建复合体的成骨性能评价。方法:采用贴壁法体外分离、培养和纯化ADSCs,光学显微镜观察其细胞学行为;构建仿生多孔磷酸三钙(β-TCP)/Ⅰ型胶原(COL-I)支架,扫描电子显微镜及MTT试验研究其物理及生物学特性;连续培养法获得ADSC细胞膜片,通过HE染色、茜素红染色检测其组织学及成骨特性;将ADSCs细胞膜片与仿生多孔磷酸三钙(β-TCP)/Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)支架复合体在成骨诱导基质中培养(组A)作为实验组,将同样数量的散在ADSCs与β-TCP/COL-Ⅰ支架(组B)及单纯ADSCs膜片(组C)在成骨诱导基质中培养作为对照组,通过碱性磷酸酶活性和骨钙蛋白分泌量定量检测分析比较复合物的成骨性能。结果:成功分离并体外培养ADSC,随传代逐步纯化;成功构建仿生多孔β-TCP/COL-Ⅰ支架,扫描电镜下显示其具有疏松多孔的三维空间结构,MTT试验结果显示ADSCs与...
【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:51 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图3-1.倒置相差显微镜观察ADSCs细胞形态:A.原代细胞接种后24h,细胞开始??12??
图3-2.扫描电镜观察P-TCP/COL-I支架呈相互连通的多孔三维结构(X50)??--
?W??图3-2.扫描电镜观察P-TCP/COL-I支架呈相互连通的多孔三维结构(X50)??3.3?P-TCP/COL-I支架细胞相容性检测??各孔内都可观察到有黑紫色结晶形成,各组细胞数量随培养时间的延长均有所??增长,实验组及对照组在各个时间点上的0D值无统计学差异(p>0.05)。结果表??明:在P-TCP/COL-I支架上生长的与在普通培养板中生长的ADSC增殖速率没有??区别,P-TCP/COL-I支架无细胞毒性,细胞相容性良好。??4?-1?一??^?Blank?control??+?TCP/COL-I?scaffold??丨??〇?*?<?i??t?>??、
【参考文献】:
期刊论文
[1]杜仲诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的有效部位[J]. 朱丽华,张贤,张艳红,谭湘陵. 中国组织工程研究. 2012(36)
[2]淫羊藿次苷Ⅱ通过激活雌激素信号通路促进骨髓间充质干细胞的成骨性分化[J]. 翟远坤,陈克明,葛宝丰,马慧萍,明磊国,程国政. 中国药理学通报. 2011(10)
[3]液氮冻融洗涤血小板对人牙髓细胞增殖的影响[J]. 李洪涛,段建民,张宏斌,片山直. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2010(06)
[4]杜仲诱导大鼠间充质干细胞成骨分化中成骨与成脂相关转录因子的表达[J]. 张贤,蔡建平,张艳红,谭湘陵. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(19)
[5]骨髓间充质干细胞生物学特性及临床应用进展[J]. 吴军,张燕燕. 中国组织工程研究与临床康复. 2007(50)
[6]脂肪组织源性基质细胞表达神经元表型的实验研究[J]. 杨立业,刘相名,孙兵,惠国桢,苗宏生,栗超跃,费俭,郭礼和. 中华神经医学杂志. 2002(01)
硕士论文
[1]P38MAPK信号通路在骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞中的作用[D]. 田龙.辽宁医学院 2013
本文编号:3455665
【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:51 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图3-1.倒置相差显微镜观察ADSCs细胞形态:A.原代细胞接种后24h,细胞开始??12??
图3-2.扫描电镜观察P-TCP/COL-I支架呈相互连通的多孔三维结构(X50)??--
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【参考文献】:
期刊论文
[1]杜仲诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的有效部位[J]. 朱丽华,张贤,张艳红,谭湘陵. 中国组织工程研究. 2012(36)
[2]淫羊藿次苷Ⅱ通过激活雌激素信号通路促进骨髓间充质干细胞的成骨性分化[J]. 翟远坤,陈克明,葛宝丰,马慧萍,明磊国,程国政. 中国药理学通报. 2011(10)
[3]液氮冻融洗涤血小板对人牙髓细胞增殖的影响[J]. 李洪涛,段建民,张宏斌,片山直. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2010(06)
[4]杜仲诱导大鼠间充质干细胞成骨分化中成骨与成脂相关转录因子的表达[J]. 张贤,蔡建平,张艳红,谭湘陵. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(19)
[5]骨髓间充质干细胞生物学特性及临床应用进展[J]. 吴军,张燕燕. 中国组织工程研究与临床康复. 2007(50)
[6]脂肪组织源性基质细胞表达神经元表型的实验研究[J]. 杨立业,刘相名,孙兵,惠国桢,苗宏生,栗超跃,费俭,郭礼和. 中华神经医学杂志. 2002(01)
硕士论文
[1]P38MAPK信号通路在骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞中的作用[D]. 田龙.辽宁医学院 2013
本文编号:3455665
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