基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的新型微泡材料联合超声在骨缺损修复中的生物学研究
发布时间：2021-11-12 08:10
目的和意义:创伤、骨肿瘤、截骨等各种原因常造成的骨缺损是临床常见的损伤,本论文研究工作围绕基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）制备的两种微泡在骨缺损治疗方面的应用等展开,为骨缺损的治疗提供新策略。构建负载内皮细胞生长因子（VEGF）的PLGA微泡载药体系,在超声的控释下,促进骨修复。另一方面,制备脂质-PLGA（Lipid/PLGA）微泡,利用超声的声场作用,促进内吞微泡干细胞吸附到3D打印聚乳酸（PLA）支架,从而促进骨修复。研究这两种体系促进骨髓间充质干细胞成骨分化的能力,以及骨缺损修复的作用。方法:（1）以超声乳化法制备内部负载VEGF蛋白的两种单体比例（75/25,50/50）的PLGA微泡,研究微泡的表征、释放曲线,进一步将材料与BMSC培养,通过茜素红染色、成骨相关基因检测评估了载VEGF的PLGA微泡联合超声靶向微泡破坏技术（UTMD）的体外促进成骨分化能力。通过构建大鼠颅骨缺损动物模型,探究载VEGF的PLGA微泡联合超声的体内成骨作用和血管生成能力。（2）采用乳化溶剂蒸发法和真空冷冻干燥技术制备多孔Lipid/PLGA微泡,制备3D打印聚乳酸（PLA）支架,检测材料...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：104 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１．?ＰＬＧＡ微泡及ＶＥＧＦ－ＰＬＧＡ微泡扫描电镜图
?博士学位论文???更长（图２－２）。我们通过ＥＬ〖ＳＡ法检测缓释出的ＶＥＧＦ的含量（图２－３），发现??载ＶＥＧＦ的ＰＬＧＡ微泡缓释可达４０天，超声处理后可促进ＶＥＧＦ的突释。??２?＜？－?／?￡?Ｉ＊８＇?，一??｜?／?％■??２?ｍ－?＊?抑－?／＊??ｇ?Ｚ?ｇ?／’??Ｉ．？－?Ｉ?ｐ．?／??｜?■?／?Ｉ?ｚ??｜?卜．／??３?？？?：．王？５５５５５＾?§?沖．‘??＜?９?Ｈ？?２０?．？？?？?６６?＜?ｕ?５?ｔ５??ＴｉｍＭ牧ｖ丨?『ｉｍＨ和》??图２－２．载ＢＳＡ的ＰＬＧＡ微泡体外缓释情况。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２．?Ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｒｅｌｅａｓｅ?ｐｒｏｆｉｌｅ?ｏｆ?ＢＳＡ?ｆｒｏｍ?ＰＬＧＡ?ｍｉｃｒｏｂｕｂｂｌｅｓ．??匕?ｉｏ〇１?．—■??ｇ?７５／２５?ＶＥＧＦ－ＭＢ??Ｓ?８０－?／／／?７５／２５ｖｅｇｆ－ｍｂ＋ｕｓ??ｇ?／／ＪＴ?４?＋?５０／５０?ＶＥＧＦ－ＭＢ??〇，?６０－?／／５０／５０?ＶＥＧＦ－ＭＢ＋ＵＳ??Ｉ?－??ｕｊ?ＯＨ?１?１?１?１??＞?０?１０?２０?３０?４０??Ｔｉｍｅ?（ｄａｙｓ）??图２－３．?ＵＴＭＤ对载ＶＥＧＦ的ＰＬＧＡ微泡体外缓释情况。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３．?Ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｒｅｌｅａｓｅ?ｐｒｏｆｉｌｅ?ｏｆ?ＶＥＧＦ?ｆｒｏｍ?５０／５０?ａｎｄ?７５／２５?ＰＬＧＡ?ＭＢｓ?ｗｉｔｈ?ｏｒ??ｗｉｔｈｏｕｔ?ＵＴＭＤ．??２．３．３?ＰＬＧＡ微泡造影结果??微泡最初面世是作为超声造影剂出现的，能显著增强
?第２章载ＶＥＧＦ的ＰＬＧＡ微泡联合超声治疗骨缺损的实验研究???现ＰＢＳ不能显示出信号，而空白微泡及载ＶＥＧＦ微泡在Ｂ超模式及谐波模式下??均显示出较好的成像性能（图２－４）。??ＰＢＳ?Ｂｌａｎｋ?ＭＢ?ＶＥＧＦ－ＭＢ??－＿＿義??图２－４．?ＰＬＧＡ微泡及载ＶＥＧＦ的ＰＬＧＡ微泡体外造影成像。上层为Ｂ－Ｍｏｄｅ模式，下层为??谐波模式。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４．?Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｂｌａｎｋ?ＰＬＧＡ?ＭＢｓ?ａｎｄ?ＶＥＧＦ－ｌｏａｄｅｄ?ＰＬＧＡ?ＭＢｓ?ｄｉｓｐｅｒｓｅｄ?ｉｎ??ＰＢＳ．?Ｕｐｐｅｒ?ｐａｎｅｌ，?Ｂ－ｍｏｄｅ?ｉｍａｇｅｓ；?ｂｏｔｔｏｍ?ｐａｎｅｌ，?ｃｏｎｔｒａｓｔ－ｍｏｄｅ?ｉｍａｇｅｓ．．??２．３．４茜素红染色结果??成骨分化是干细胞的一个重要特性，成骨分化过程中钙离子能够以钙盐的??形式沉淀。本实验中，我们通过茜素红染色检测材料的成骨性能。茜素红染色??的基本原理就是通过茜素红和钙发生显示反应，产生一种深红色的带色化合物。??实验分组为：单体比例为７５／２５、５０／５０的空白ＰＬＧＡ微泡（ＢｌａｎｋＭＢ）、载ＶＥＧＦ??的?ＰＬＧＡ?微泡（ＶＥＧＦ－ＭＢ）、载?ＶＥＧＦ?的?ＰＬＧＡ?微泡联合超声（ＶＥＧＦ－ＭＢ＋ＵＳ）。??ＢＭＳＣ细胞与微泡共培养２１天后，进行染色。茜素红染色矿化面积：７５／２５ＶＥＧＦ??微泡、５０／５０ＶＥＧＦ微泡联合超声照射两组显著高于空白微泡对照组及未加超声??ＶＥＧＦ微泡组（图２－５）。提示超声照射可促进ＶＥＧＦ的释放，从而促进成骨分??化中的钙盐生成。??２２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Injectable hydrogels for cartilage and bone tissue engineering[J]. Mei Liu,Xin Zeng,Chao Ma,Huan Yi,Zeeshan Ali,Xianbo Mou,Song Li,Yan Deng,Nongyue He. Bone Research. 2017(02)
硕士论文
[1]多孔Lipid-PLGA杂合微泡用于无创性影像引导靶向药物递送的多功能平台的研究[D]. 梁杨标.南方医科大学 2019
本文编号：3490509
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：104 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－１．?ＰＬＧＡ微泡及ＶＥＧＦ－ＰＬＧＡ微泡扫描电镜图
?博士学位论文???更长（图２－２）。我们通过ＥＬ〖ＳＡ法检测缓释出的ＶＥＧＦ的含量（图２－３），发现??载ＶＥＧＦ的ＰＬＧＡ微泡缓释可达４０天，超声处理后可促进ＶＥＧＦ的突释。??２?＜？－?／?￡?Ｉ＊８＇?，一??｜?／?％■??２?ｍ－?＊?抑－?／＊??ｇ?Ｚ?ｇ?／’??Ｉ．？－?Ｉ?ｐ．?／??｜?■?／?Ｉ?ｚ??｜?卜．／??３?？？?：．王？５５５５５＾?§?沖．‘??＜?９?Ｈ？?２０?．？？?？?６６?＜?ｕ?５?ｔ５??ＴｉｍＭ牧ｖ丨?『ｉｍＨ和》??图２－２．载ＢＳＡ的ＰＬＧＡ微泡体外缓释情况。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２．?Ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｒｅｌｅａｓｅ?ｐｒｏｆｉｌｅ?ｏｆ?ＢＳＡ?ｆｒｏｍ?ＰＬＧＡ?ｍｉｃｒｏｂｕｂｂｌｅｓ．??匕?ｉｏ〇１?．—■??ｇ?７５／２５?ＶＥＧＦ－ＭＢ??Ｓ?８０－?／／／?７５／２５ｖｅｇｆ－ｍｂ＋ｕｓ??ｇ?／／ＪＴ?４?＋?５０／５０?ＶＥＧＦ－ＭＢ??〇，?６０－?／／５０／５０?ＶＥＧＦ－ＭＢ＋ＵＳ??Ｉ?－??ｕｊ?ＯＨ?１?１?１?１??＞?０?１０?２０?３０?４０??Ｔｉｍｅ?（ｄａｙｓ）??图２－３．?ＵＴＭＤ对载ＶＥＧＦ的ＰＬＧＡ微泡体外缓释情况。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３．?Ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｒｅｌｅａｓｅ?ｐｒｏｆｉｌｅ?ｏｆ?ＶＥＧＦ?ｆｒｏｍ?５０／５０?ａｎｄ?７５／２５?ＰＬＧＡ?ＭＢｓ?ｗｉｔｈ?ｏｒ??ｗｉｔｈｏｕｔ?ＵＴＭＤ．??２．３．３?ＰＬＧＡ微泡造影结果??微泡最初面世是作为超声造影剂出现的，能显著增强
?第２章载ＶＥＧＦ的ＰＬＧＡ微泡联合超声治疗骨缺损的实验研究???现ＰＢＳ不能显示出信号，而空白微泡及载ＶＥＧＦ微泡在Ｂ超模式及谐波模式下??均显示出较好的成像性能（图２－４）。??ＰＢＳ?Ｂｌａｎｋ?ＭＢ?ＶＥＧＦ－ＭＢ??－＿＿義??图２－４．?ＰＬＧＡ微泡及载ＶＥＧＦ的ＰＬＧＡ微泡体外造影成像。上层为Ｂ－Ｍｏｄｅ模式，下层为??谐波模式。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４．?Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｂｌａｎｋ?ＰＬＧＡ?ＭＢｓ?ａｎｄ?ＶＥＧＦ－ｌｏａｄｅｄ?ＰＬＧＡ?ＭＢｓ?ｄｉｓｐｅｒｓｅｄ?ｉｎ??ＰＢＳ．?Ｕｐｐｅｒ?ｐａｎｅｌ，?Ｂ－ｍｏｄｅ?ｉｍａｇｅｓ；?ｂｏｔｔｏｍ?ｐａｎｅｌ，?ｃｏｎｔｒａｓｔ－ｍｏｄｅ?ｉｍａｇｅｓ．．??２．３．４茜素红染色结果??成骨分化是干细胞的一个重要特性，成骨分化过程中钙离子能够以钙盐的??形式沉淀。本实验中，我们通过茜素红染色检测材料的成骨性能。茜素红染色??的基本原理就是通过茜素红和钙发生显示反应，产生一种深红色的带色化合物。??实验分组为：单体比例为７５／２５、５０／５０的空白ＰＬＧＡ微泡（ＢｌａｎｋＭＢ）、载ＶＥＧＦ??的?ＰＬＧＡ?微泡（ＶＥＧＦ－ＭＢ）、载?ＶＥＧＦ?的?ＰＬＧＡ?微泡联合超声（ＶＥＧＦ－ＭＢ＋ＵＳ）。??ＢＭＳＣ细胞与微泡共培养２１天后，进行染色。茜素红染色矿化面积：７５／２５ＶＥＧＦ??微泡、５０／５０ＶＥＧＦ微泡联合超声照射两组显著高于空白微泡对照组及未加超声??ＶＥＧＦ微泡组（图２－５）。提示超声照射可促进ＶＥＧＦ的释放，从而促进成骨分??化中的钙盐生成。??２２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]Injectable hydrogels for cartilage and bone tissue engineering[J]. Mei Liu,Xin Zeng,Chao Ma,Huan Yi,Zeeshan Ali,Xianbo Mou,Song Li,Yan Deng,Nongyue He. Bone Research. 2017(02)
硕士论文
[1]多孔Lipid-PLGA杂合微泡用于无创性影像引导靶向药物递送的多功能平台的研究[D]. 梁杨标.南方医科大学 2019
本文编号：3490509
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