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多壁碳纳米管/聚左旋乳酸复合纳米纤维支架材料与小鼠神经干细胞的生物相容性

发布时间:2021-11-26 13:23
  背景:聚左旋乳酸(PLLA)支架材料在生物材料领域中尤其是组织工程学中应用广泛,但亲水性较低、缺乏表面细胞结合位点和细胞黏附性较差等缺点制约着其进一步应用。目的:体外实验观察小鼠神经干细胞与多壁碳纳米管/聚左旋乳酸(MWCNTs/PLLA)纳米纤维支架材料复合培养的生长状况并检测其生物相容性。方法:分离培养小鼠神经干细胞,静电纺丝法制备PLLA纳米纤维支架材料并用MWCNTs修饰;取第3代神经干细胞分别接种于PLLA与MWCNTs/PLLA纳米纤维支架材料上,进行体外培养。结果与结论:1神经干细胞在PLLA及MWCNTs/PLLA支架材料中生存良好,材料无明显毒性;2神经干细胞在MWCNTs/PLLA材料上表现出比PLLA支架材料更加优异的细胞黏附能力及增殖能力;3扫描电镜及Hoechst 33342染色显示神经干细胞在材料表面生长良好,形态正常;4免疫荧光MAP2染色显示神经干细胞在MWCNTs/PLLA支架材料上生长并分化为成熟神经元,且神经元突起生长方向与纳米纤维支架方向一致;5结果表明,MWCNTs/PLLA纳米纤维支架材料的细胞相容性良好,能为神经干细胞提供良好的生长载体且有... 

【文章来源】:中国组织工程研究. 2017,21(06)北大核心

【文章页数】:6 页

【部分图文】:

多壁碳纳米管/聚左旋乳酸复合纳米纤维支架材料与小鼠神经干细胞的生物相容性


小鼠神经干细胞的鉴定(×100)

神经干细胞,支架材料


s图注:图中A(×6000)为扫描电镜下静电纺丝PLLA纳米纤维支架;B(×6000)和C(×20000)为MWCNTs/PLLA纳米纤维支架,MWCNTs/PLLA材料粗糙度更高,更有利于细胞的黏附;D(×3000)和E(×2000)分别为神经干细胞复合MWCNTs/PLLA材料培养2d及7d,细胞沿着纳米纤维材料方向分化生长;F(×100)为MWCNTs/PLLA材料Hoechst染色,显示细胞形态正常,未见明显的凋亡和坏死。PLLA:聚左旋乳酸;MWCNTs/PLLA:多壁碳纳米管/聚左旋乳酸。2.52.01.51.00.50MWNTC/PLsAL与LAP值比GAPDHTUJ1MAP2GFAPaaa图6神经干细胞复合MWCNTs/PLLA支架材料培养(×100)Figure6Neuralstemcellsculturedonmulti-walledcarbonnanotubes/poly(L-lacticacid)nanofiberscaffolds(×100)图注:图中A-C为神经干细胞复合MWCNT/PLLA支架材料分化培养14d,神经元标志物MAP2染色显示神经干细胞分化为成熟神经元,且神经元突起生长方向与纳米材料纤维方向一致;D为荧光定量PCR检测神经元及胶质细胞标志物TUJ1、MAP2与GFAP表达,发现相对于PLLA支架材料,在MWCNTs/PLLA材料中神经干细胞的分化程度更高,差异有显著性意义(aP<0.05)。2.01.61.20.80.40PLLAMWCNTs/PLLA光度值吸1d3d5d7d9daaaa图4神经干细胞在PLLA和MWCNTs/PLLA支架材料上的增殖能力Figure4Theproliferationofneuralstemcellsonpoly(L-lacticacid)andmulti-walledcarbonnanotubes/poly(L-lacticacid)nanofiberscaffolds图注:随着时间的增加,两组材料的吸光度值均增加。在第3,5,7,9天时,MWCNTs/PLLA组的吸光度值均高于PLLA组,差异有显著性意义(aP<0.05)。PLLA:聚左旋乳酸;MWCNTs/PLLA:多壁碳纳米管/聚左旋乳酸。图注:图中A为小鼠神经干细胞悬浮?

神经干细胞,小鼠


林成楷,等.多壁碳纳米管/聚左旋乳酸复合纳米纤维支架材料与小鼠神经干细胞的生物相容性ISSN2095-4344CN21-1581/RCODEN:ZLKHAH943www.CRTER.orgABC图1小鼠神经干细胞的鉴定(×100)Figure1Identificationofmouseneuralstemcells(×100)PLLAMWCNTs/PLLA100806040200胞黏附细率%)(4h8h12haaa图3神经干细胞复合PLLA和MWCNTs/PLLA支架材料培养4,8,12h后的细胞黏附率Figure3Adhesionratesofneuralstemcellsafterincubationwithpoly(L-lacticacid)andmulti-walledcarbonnanotubes/poly(L-lacticacid)nanofiberscaffoldsfor4,8and12hours图注:随着时间的增加,神经干细胞在2种材料上的黏附率呈增长趋势。在不同时间点,MWCNTs/PLLA组的细胞黏附率均明显高于PLLA组,差异有显著性意义(aP<0.05)。PLLA:聚左旋乳酸;MWCNTs/PLLA:多壁碳纳米管/聚左旋乳酸。D图5支架材料和神经干细胞复合支架材料的形态学观察Figure5Morphologicalobservationofscaffoldsandneuralstemcellsonscaffolds图注:图中A(×6000)为扫描电镜下静电纺丝PLLA纳米纤维支架;B(×6000)和C(×20000)为MWCNTs/PLLA纳米纤维支架,MWCNTs/PLLA材料粗糙度更高,更有利于细胞的黏附;D(×3000)和E(×2000)分别为神经干细胞复合MWCNTs/PLLA材料培养2d及7d,细胞沿着纳米纤维材料方向分化生长;F(×100)为MWCNTs/PLLA材料Hoechst染色,显示细胞形态正常,未见明显的凋亡和坏死。PLLA:聚左旋乳酸;MWCNTs/PLLA:多壁碳纳米管/聚左旋乳酸。2.52.01.51.00.50MWNTC/PLsAL与LAP值比GAPDHTUJ1MAP2GFAPaaa图6神经干细胞复合MWCNTs/PLLA支架材料培养(×100)Figure6Neuralstemcellsculturedonmulti-walledc

【参考文献】:
期刊论文
[1]组织工程支架在犬急性脊髓损伤修复中应用的初步研究[J]. 倪石磊,齐宏旭,鲍圣德,胡平,王波,张家涌,李良,张扬.  中国微侵袭神经外科杂志. 2005(09)



本文编号:3520233

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