不同浓度海藻糖对液氮深低温保存同种带瓣大动脉组织的保护作用及其对caspase-3表达的影响
发布时间:2022-05-10 19:59
目的观察海藻糖作为冷冻保护剂冻存同种带瓣大动脉组织,寻求最佳的冷冻保护剂并探讨冷冻保护剂的最佳适宜浓度以及带瓣大动脉组织caspase-3的表达。方法在液氮中冻存时间点分为12个月,15个月,18个月,依据冻存液不同分为5组,分别是:0.1mol/L DMSO(对照组),0.1mol/L海藻糖(实验组1),0.1mol/L海藻糖+0.1mol/L DMSO(实验组2),0.2mol/L海藻糖+0.1mol/L DMSO(实验组3),0.3mol/L海藻糖+0.1mol/L DMSO(实验组4)。免疫组化光镜观察组织细胞凋亡,测定血糖浓度检测组织细胞代谢情况。采用RT-PCR和Western Blot方法分别测定Caspase-3的相对表达量。新鲜组作为阴性对照。结果随着保存时间的延长,同种带瓣大动脉组织和细胞破坏逐渐加重。光镜下观察,新鲜大动脉组织均为弱阳性,各组标本与新鲜组织比较均有明显改变(d=37-43,P<0.05)。各组之间除实验组2和实验组3比较无差异外(d=66-72,P>0.05)其余各组比较均有差异(d=0-42,P<0.05),细胞凋亡最轻的是新鲜...
【文章页数】:38 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
第一章 材料和方法
1.1 实验对象
1.1.1 采用Jashari等的抗生素配方
1.1.2 实验分组
1.2 试剂和仪器设备
1.2.1 主要试剂
1.2.2 主要仪器设备
1.3 冻存液的配置
1.4 保存
1.5 解冻及漂洗
1.6 实验方法
1.6.1 免疫组化
1.6.1.1 免疫组化方法
1.6.1.2 免疫组化结果判读
1.6.2 糖代谢测定
1.6.3 RT-PCR
1.6.4 Western-Blot
1.7 统计方法
第二章 实验结果
2.1 肉眼观察
2.2 光镜观察
2.3 糖代谢
2.4 RT-PCR
2.5 Western-Blot
第三章 讨论
3.1 同种带瓣大动脉组织的保存
3.3 同种带瓣大动脉的应用
3.4 同种带瓣动脉的灭菌、降温和复温
3.5 细胞凋亡
3.6 葡萄糖消耗量测定
3.7 海藻糖与DMSO
结论
参考文献
文献综述
参考文献
附录
攻读学位期间发表的论文
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]大鼠皮肤的冷冻干燥保存[J]. 杨维,姜曼,耿文鑫,严兴荣,都慧聪,魏菁,刘亮岐,赵洁,李立文,陈富林. 中国组织工程研究与临床康复. 2009(41)
[2]兔胚胎玻璃化冷冻的研究[J]. 金花子,金庆国,李钟淑,郑东吉,方南洙. 延边大学农学学报. 2009(02)
[3]冷冻干燥保存兔血小板的实验研究[J]. 刘景汉,张长虹,周俊,卢发强,杨连贵. 中国输血杂志. 2008(09)
[4]海藻多糖对博来霉素诱导的大鼠肺间质纤维化模型的干预作用研究[J]. 秦华,李栋,曹广生. 齐鲁药事. 2008(09)
[5]纯化后海藻硫酸多糖-蛋白复合物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用的研究[J]. 嵇蓉,王长振,丛建波,先宏,孙存普,吴可. 解放军药学学报. 2008(04)
[6]海藻糖对红细胞保养液中ATP酶活性的保护作用[J]. 高勇,孟宪军. 中国输血杂志. 2008(07)
[7]人血小板的冷冻干燥保存:细胞内外保护剂的作用[J]. 周新丽,张绍志,陈光明. 制冷学报. 2008(02)
[8]新型抗冻剂海藻糖对低温保存皮肤组织α-辅肌动蛋白表达的实验研究[J]. 贾晓明,于瑜,李东杰. 中国修复重建外科杂志. 2008(04)
[9]二甲亚砜对血小板冻存中功能保护作用的实验研究[J]. 周俊,刘景汉,金玉,欧阳锡林,杨连贵. 中国实验血液学杂志. 2007(06)
[10]海藻多糖抗衰老作用的研究进展[J]. 刘金凤,曲有乐. 黑龙江医药科学. 2006(06)
本文编号:3652604
【文章页数】:38 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
第一章 材料和方法
1.1 实验对象
1.1.1 采用Jashari等的抗生素配方
1.1.2 实验分组
1.2 试剂和仪器设备
1.2.1 主要试剂
1.2.2 主要仪器设备
1.3 冻存液的配置
1.4 保存
1.5 解冻及漂洗
1.6 实验方法
1.6.1 免疫组化
1.6.1.1 免疫组化方法
1.6.1.2 免疫组化结果判读
1.6.2 糖代谢测定
1.6.3 RT-PCR
1.6.4 Western-Blot
1.7 统计方法
第二章 实验结果
2.1 肉眼观察
2.2 光镜观察
2.3 糖代谢
2.4 RT-PCR
2.5 Western-Blot
第三章 讨论
3.1 同种带瓣大动脉组织的保存
3.3 同种带瓣大动脉的应用
3.4 同种带瓣动脉的灭菌、降温和复温
3.5 细胞凋亡
3.6 葡萄糖消耗量测定
3.7 海藻糖与DMSO
结论
参考文献
文献综述
参考文献
附录
攻读学位期间发表的论文
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]大鼠皮肤的冷冻干燥保存[J]. 杨维,姜曼,耿文鑫,严兴荣,都慧聪,魏菁,刘亮岐,赵洁,李立文,陈富林. 中国组织工程研究与临床康复. 2009(41)
[2]兔胚胎玻璃化冷冻的研究[J]. 金花子,金庆国,李钟淑,郑东吉,方南洙. 延边大学农学学报. 2009(02)
[3]冷冻干燥保存兔血小板的实验研究[J]. 刘景汉,张长虹,周俊,卢发强,杨连贵. 中国输血杂志. 2008(09)
[4]海藻多糖对博来霉素诱导的大鼠肺间质纤维化模型的干预作用研究[J]. 秦华,李栋,曹广生. 齐鲁药事. 2008(09)
[5]纯化后海藻硫酸多糖-蛋白复合物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用的研究[J]. 嵇蓉,王长振,丛建波,先宏,孙存普,吴可. 解放军药学学报. 2008(04)
[6]海藻糖对红细胞保养液中ATP酶活性的保护作用[J]. 高勇,孟宪军. 中国输血杂志. 2008(07)
[7]人血小板的冷冻干燥保存:细胞内外保护剂的作用[J]. 周新丽,张绍志,陈光明. 制冷学报. 2008(02)
[8]新型抗冻剂海藻糖对低温保存皮肤组织α-辅肌动蛋白表达的实验研究[J]. 贾晓明,于瑜,李东杰. 中国修复重建外科杂志. 2008(04)
[9]二甲亚砜对血小板冻存中功能保护作用的实验研究[J]. 周俊,刘景汉,金玉,欧阳锡林,杨连贵. 中国实验血液学杂志. 2007(06)
[10]海藻多糖抗衰老作用的研究进展[J]. 刘金凤,曲有乐. 黑龙江医药科学. 2006(06)
本文编号:3652604
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