BMP-2基因修饰BMSCs复合nHAC/PLA材料体外构建组织工程骨的实验研究

发布时间：2022-10-04 18:39

　　目的用携带骨形态发生蛋白-2（BMP-2）基因的慢病毒病毒载体转染SD大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）,接种于纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸（nHAC/PLA）材料构建组织工程骨,体外观察成骨表达情况。 方法体外分离、培养SD大鼠骨髓基质干细胞,传代培养后分为A、B、C组。A组为BMP-2和eGFP转染组;B组为空慢病毒病毒载体转染组;C组为未转染组。取携带BMP-2和增强型绿色荧光蛋白（eGFP）的慢病毒（MOI=25pfu/cell）感染SD大鼠BMSCs。荧光显微镜下观察eGFP的表达,判断感染效率及细胞生长情况。通过噻唑篮（MTT）和流式细胞仪（FCM）检测转染后细胞生长增殖活力及对细胞周期的影响。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组化和酶联免疫吸附反应（ELISA）检测BMP-2蛋白的表达。转染成功后接种于nHAC/PLA支架,构建组织工程骨。碱性磷酸酶（ALP）检测试剂盒检测ALP活性,茜红素染色检了解成骨情况;扫描电镜观察细胞在支架材料中的黏附、生长和合成分泌骨基质的情况。 结果①经密度梯度离心法分离、贴壁筛选、培养所获的细胞,经鉴定是鼠的BMSCs,... 

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

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期刊论文
[1]HA复合rhBMP-2转染的BMSCs对羊胫骨延长骨愈合的影响[J]. 林在俊,朱振安,汤亭亭,戴尅戎,楼觉人,孟凡琳.  中国修复重建外科杂志. 2008(02)
[2]活性纳米羟基磷灰石复合胶原/聚乳酸材料修复颅骨极限缺损的实验研究[J]. 陈鹏,刘冰.  中国修复重建外科杂志. 2007(11)
[3]成人骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向诱导分化的实验研究[J]. 朱伟,孙俊英,岑建龙,朱礼贤,顾联.  实用医学杂志. 2007(18)
[4]骨髓基质干细胞BMP-2和bFGF基因的联合修饰[J]. 李毅,陈槐卿,成敏,唐艳娟.  细胞与分子免疫学杂志. 2006(02)
[5]多孔纳米羟基磷灰石／胶原复合材料的制备及性能[J]. 马宁,曾毅,张莉,杨海滨,张明.  吉林大学学报(医学版). 2006(01)
[6]大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养表型鉴定与标记[J]. 何忠杰,马俊勋,方驰华,杨丽萍.  中国急救医学. 2005(12)
[7]骨形成蛋白2基因修复兔桡骨缺损的实验研究[J]. 李建军,白伦浩,孙鸿斌,韩冬,顾稼祥,王欢,段景柱,徐莘香.  中国修复重建外科杂志. 2005(09)
[8]生物模仿自装配的无机化胶原的纳米纤维(英文)[J]. 崔福斋,张伟,于兴.  大连大学学报. 2004(02)
[9]hBMP-2基因转染骨髓基质细胞及效果检测[J]. 郑德宇,秦书俭,郑国顺,姚素艳.  解剖科学进展. 2004(02)
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本文编号：3685560