不同冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响

发布时间：2017-05-17 17:22

  本文关键词：不同冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：冷冻保存是皮肤移植研究中的一项重要技术,在保存过程中使用冷冻保护剂可以预防组织细胞受到低温损伤。本研究比较三种不同的冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的影响,寻求一种最佳的冷冻保护剂,为低温冷冻保存皮肤的临床应用提供依据。 方法：选用健康的雄性Wistar大鼠,取其新鲜皮肤组织分成三组,分别用海藻糖/二甲基亚砜(Ⅰ组),丙二醇/二甲基亚砜(Ⅱ组),乙酰胺/二甲基亚砜(Ⅲ组)冷冻保护剂预处理10、20、30、40、50、60mmin。对照组(Ⅳ组)不使用冷冻保护剂。将对照组和实验组密封在塑料包装中并做好标记,-26℃保存24h,-80℃保存14d。将冷冻保存后的大鼠皮肤快速复温,采用琥珀酸脱氢酶测定法测定大鼠皮肤的活性。 结果：实验Ⅰ组的大鼠皮肤活性优于其他三组,经统计学方法检验分析,各组之间的差异具有统计学意义(P0.05)。大鼠皮肤活性随冷冻保护剂预处理时间的延长逐渐升高,在30mmin时达到峰值然后逐渐下降,60mmin以后低于对照组。 结论：海藻糖/二甲基亚砜冷冻保护剂对冷冻保存大鼠皮肤活性的保护作用优于丙二醇/二甲基亚砜和乙酰胺/二甲基亚砜。冷冻保存前预处理30mmin能达到最佳的保护效果。
【关键词】：冷冻保存 活性 海藻糖 二甲基亚砜 琥珀酸脱氢酶
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.52
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-7
• 目录7-9
• 一 引言9-24
• 1.1 皮肤冷冻保存的基础10-17
• 1.1.1 皮肤的结构10-13
• 1.1.2 皮肤的生理功能13-14
• 1.1.3 皮肤的损伤与修复14-17
• 1.2 皮肤冷冻保存的方法17-21
• 1.2.1 普通保存法17-18
• 1.2.2 深低温保存法18
• 1.2.3 玻璃化保存法18-19
• 1.2.4 冷冻保护剂19-21
• 1.3 皮肤活性的测定21-24
• 1.3.1 皮肤耗氧量测定法21
• 1.3.2 皮肤培养移植测定法21-22
• 1.3.3 台盼蓝染色测定法22
• 1.3.4 双重核酸染色测定法22-23
• 1.3.5 琥珀酸脱氢酶测定法23-24
• 二 材料与方法24-32
• 2.1 研究对象24
• 2.2 仪器材料24-27
• 2.2.1 主要仪器24
• 2.2.2 主要试剂24-25
• 2.2.3 主要溶液的配制25-27
• 2.3 实验方法27-31
• 2.3.1 标本采集27
• 2.3.2 实验分组27
• 2.3.3 鼠皮冷冻保存与复温27
• 2.3.4 琥珀酸脱氢酶法测定鼠皮活性27-31
• 2.4 数据处理31-32
• 2.4.1 计算皮肤活力值及皮肤活力百分率31
• 2.4.2 统计学分析31
• 2.4.3 质量控制与偏倚的防止31-32
• 三 结果32-38
• 3.1 不同预处理时间对鼠皮活性的影响32-36
• 3.2 不同冷冻保护剂对鼠皮活性的影响36-38
• 四 讨论38-43
• 4.1 移植皮肤的活性对创面的影响38
• 4.2 冷冻保存引起细胞损伤的机理38-39
• 4.3 冷冻保存方法对皮肤活性的影响39-40
• 4.4 冷冻保护剂对皮肤活性的影响40-41
• 4.5 海藻糖在皮肤保存中的应用研究41-42
• 4.6 研究不足与改进42-43
• 参考文献43-47
• 攻读硕士期间发表的学术论文及研究成果47-48
• 致谢48

【参考文献】

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本文编号：374054