羧乙基壳聚糖/纳米羟基磷灰石三维支架构建组织工程气管的实验研究

发布时间：2023-03-09 18:28

　　目的： 探讨羧乙基壳聚糖/纳米羟基磷灰石三维支架构建组织工程气管的可行性 一、通过原代软骨细胞的体外培养和鉴定,探讨其成为组织工程气管种子细胞的可行性。 二、制备羧乙基壳聚糖/纳米羟基磷灰石(NCECS/n-HA)三维支架构,通过体外种植软骨细胞,观察软骨细胞在支架表面的生长情况,探讨NCECS/n-HA三维泡沫型支架构建组织工程气管的可行性。 方法： (1)通过两步酶消化法获得兔耳廓原代软骨细胞并进行传代培养。(2)通过免疫组织化学、免疫荧光以及甲苯胺蓝染色对获得的软骨细胞实施Ⅱ型胶原、糖胺聚糖检测,进行鉴定。(3)通过真空冷冻干燥法制得NCECS/n-HA三维泡沫型支架,并用扫描电镜(SEM)检测支架表面的成孔率和孔径大小。(4)体外将第2代软骨细胞种植到NCECS/n-HA支架表面共同培养一周,SEM检测软骨细胞在支架表面的生长情况。 结果： (1)通过胰酶和Ⅱ型胶原酶联合消化法可以获得相对较纯净的软骨细胞,差速贴壁法和机械刮除法有助于原代软骨细胞的进一步纯化。(2)Ⅱ型胶原免疫组织化学、Ⅱ型胶原免疫荧光以及甲苯胺蓝染色显示获得的细胞可以特异性地分Ⅱ型胶原和糖胺聚糖,证实获得的细...

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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缩略语表
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 软骨细胞的体外原代培养及鉴定
    一 材料与方法
    二 结果
    三 讨论
第二部分 NCECS/n-HA三维支架构建组织工程气管
    一 材料与方法
    二 结果
    三 讨论
参考文献
结论
附图
文献综述
    参考文献
致谢
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本文编号：3758080