PLA/HA复合物的化学及微结构表面特性对人MSCs增殖及骨向分化的独立影响

发布时间：2023-09-29 01:53

　　目的：因创伤、疾病导致的器官或组织缺损的修复一直是临床亟待解决的难题。近年来的研究主要致力于发展能够代替自体骨移植物的人工合成材料以修复这些缺损的器官或组织。由于与骨的无机成分相似,很长一段时间以来,磷酸钙(calcium phosphate, CaP)陶瓷一直是被广泛应用的人工合成的骨替代材料,但其机械强度及骨再生能力仍无法与自然再生骨相比。在保留其人工合成的特性下,很多措施被应用于改善CaP陶瓷的生物活性,常用的如改变材料的化学组成、控制材料的表面形貌等。但CaP陶瓷是相对复杂的生物材料,其理化性能交织缠绕在一起,这使得在不改变陶瓷的其它特性的前提下单独改变其某一特性变得非常困难。造成的结果是,很难将某一类型的生物反应与材料的某一个或某几个特性关联在一起,而这对于设计与自体骨移植物功能相当的新型骨移植替代物来说是至关重要的。为了改善目前存在的人工合成的骨移植替代物,有必要深入理解其某一性能对生物反应的影响,进而寻找出恰当的方法将我们期望的性能合并在一起以获得新的、改良的功能性生物材料。为此,我们研制出了具有可控的微米级表面形貌的聚乳酸／纳米羟基磷灰石复合物(poly (lactic...

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【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
缩略词表
前言
第一部分 PLA/HA复合物的制备及表面微形貌化
    1. 材料与方法
        1.1. 实验仪器和实验材料
            1.1.1. 主要实验仪器
            1.1.2. 主要实验材料
        1.2. PLA/HA复合物的制备
            1.2.1. HA粉的合成
            1.2.2. 制备PLA/HA复合物
        1.3. PLA/HA复合物及PLA的表面微形貌化
            1.3.1. 制取聚二甲硅氧烷(Inverse polydimethyl siloxane,PDMS)阴模
            1.3.2. 材料表面微形貌化
    2. 结果
        2.1. 材料特征
        2.2. PLA/HA复合物及PLA表面微形貌的特征
    3. 讨论
第二部分 不同表面形貌的PLA/HA复合物及PLA对hMSCs形态、增殖、骨向分化和骨相关基因表达的影响
    1. 材料与方法
        1.1. 实验仪器和实验试剂
            1.1.1. 主要实验仪器与软件
            1.1.2. 主要实验试剂
            1.1.3. 主要培养液和试剂的配制
        1.2. hMSCs的分离和扩增
        1.3. hMSCs在不同表面微形貌的PLA/HA复合物及PLA上的培养…
        1.4. 细胞形态的观察分析
            1.4.1. 荧光显微镜观察细胞形态(DAPI/Phalloidin染色)
            1.4.2. SEM观察细胞形态
        1.5. 细胞增殖与骨向分化
            1.5.1. DNA测定
            1.5.2. 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)测定
        1.6. 骨相关基因表达的检测
            1.6.1. 总RNA的提取
            1.6.2. 逆转录
            1.6.3. 实施定量PCR(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)
        1.7. 培养基中Ca²⁺and Pi浓度的测定
            1.7.1. Ca²⁺测定
            1.7.2. Pi测定
        1.8. 材料表面形貌的SEM观察
        1.9. 统计学分析
    2. 结果
        2.1. 细胞粘附与细胞形态
        2.2. hMSCs在形貌化的PLA/HA复合物及PLA上的增殖
        2.3. hMSCs在形貌化的PLA/HA复合物及PLA上的骨向分化
        2.4. hMSCs培养过程中Ca²⁺、Pi浓度的变化
        2.5. 材料表面形貌的变化
    3. 讨论
结论
参考文献
致谢
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英文论文2



本文编号：3849051