与“精准医学”的一次邂逅——从利用杂交瘤技术制备单抗说起
发布时间:2024-04-21 14:15
在"动物细胞融合与单克隆抗体"一课的教学中,将社会热点话题"精准医学"带进了生物学课堂。"精准医学"不仅为社会带来直观的医学价值,体现了医学工作者的创新思维和生物技术的魅力,也在课堂中提升了学生社会责任意识,强化科学观念,为"精准教学"的发展提供了启示。
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【部分图文】:
本文编号:3960990
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图1诱导动物细胞融合
无论通过什么手段诱导细胞融合,融合产物都非常复杂。有未融合的细胞、相同类型融合的细胞,以及不同类型融合的细胞(图1)。所以必须经过筛选才能获得由不同类型融合的杂交瘤细胞。细胞合成DNA通常有2条途径:1)主要途径,利用糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA。2)替代途径,通过HGP....
图2HAT培养基筛选杂交瘤细胞
实验中的小鼠骨髓瘤细胞是一类HGPRT代谢缺陷型细胞。因此在HAT培养基中,未融合与融合的骨髓瘤细胞在甲氨蝶呤A的阻遏下不能合成DNA,细胞因无法增殖而死亡(图2)。未融合与融合的免疫B细胞,因本身不具备增殖能力,5~7d也凋亡了。最终在HAT培养基中,只有杂交瘤细胞可通过替代....
图3筛选产生专一抗体的杂交瘤细胞
第2次筛选是为了获得能产生专一抗体的杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞培养液通过有限稀释的方法将细胞分开,再进行细胞的克隆化培养,获得单克隆细胞群。最后利用抗体筛选技术,例如酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫荧光标记法(IFA)等,对单克隆细胞产生的抗体进行阳性检测,即可筛选出能产生专一....
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