明胶-羟基磷灰石支架材料促进大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化

发布时间：2024-07-07 19:00

　　目的探讨共沉淀法合成的明胶-羟基磷灰石支架材料的理化性质及其对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖分化的影响,并通过动物实验验证该支架材料促进大鼠颅骨缺损的骨修复。方法全骨髓贴壁法分离纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞;对第2代细胞表面标记分子进行流式细胞术分析;P2代进行矿化诱导21天,茜素红染色分析细胞的成骨分化潜能;采用不同循环次数的共沉淀法制备复合羟基磷灰石的明胶载体并对材料理化表征进行分析;采用扫描电镜、CCK-8、死活实验观察材料对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响,碱性磷酸酶定量分析材料对其成骨分化的影响。成年雄性SD大鼠12只,每组4只,随机分成A、B、C三组。所有大鼠均在左右颅骨处去骨,造直径为5mm,深度约为3mm的圆形骨缺损。A组左侧放置r BMSCs-1HA-Gel复合物,右侧为阴性空白对照组;B组组左侧放置r BMSCs-Gel复合物,右侧为阴性空白对照组;C组左侧放置r BMSCs-1HA-Gel复合物,右侧放置r BMSCs-Gel复合物。术后12周行摄CBCT,然后取材,并制作组织学切片进行HE、Masson染色。对两组大鼠颅骨缺损处的骨缺损修复、愈合情况进行评价。上述所...

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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英文摘要
1 前言
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 材料与设备
        2.1.2 部分材料的配制及储存方法
    2.2 方法
        2.2.1 SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养与鉴定
        2.2.2 明胶-羟基磷灰石仿生支架材料的制备与表征
            2.2.2.1 明胶-羟基磷灰石仿生支架材料的制备
            2.2.2.2 明胶-羟基磷灰石仿生支架材料的理化检测
            2.2.2.3 明胶-羟基磷灰石仿生支架材料的细胞相容性检测
        2.2.3 明胶-羟基磷灰石仿生支架材料修复大鼠颅骨缺损的体内实验研究
            2.2.3.1 SD大鼠颅骨缺损模型的建立
            2.2.3.2 SD大鼠颅骨缺损模型的CBCT检测
            2.2.3.3 SD大鼠颅骨缺损模型的HE染色和Masson染色
    2.3 统计学处理
3 结果
    3.1 SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养
    3.2 SD大鼠骨髓间充质干细胞表面特定抗原的鉴定
    3.3 SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化潜能的鉴定
    3.4 成功制备明胶-羟基磷灰石仿生支架材料
    3.5 明胶-羟基磷灰石仿生支架材料的形貌特征与理化特性
    3.6 明胶-羟基磷灰石仿生支架材料的生物相容性评价
    3.7 成功建立SD大鼠颅骨缺损模型
    3.8 CBCT 检测
    3.9 HE 染色和 Masson 染色
4 讨论
5 结论
参考文献
附录
致谢
综述 层层自组装技术在组织工程领域的研究进展
    参考文献



本文编号：4003634