间充质源性种子细胞复合异体脱细胞软骨构建软骨组织的实验研究
发布时间:2024-12-11 22:01
目的 软骨缺损一直是临床工作的一大难题,自体软骨来源少,异体软骨吸收明显,均限制了同种软骨组织的应用,近年组织工程的研究发展为这一难题的解决带来了新的机遇,大量软骨组织工程的研究,带动了人工软骨时代的到来。本实验体外诱导外周血源性间充质干细胞获得软骨种子细胞,分离异体兔肋软骨获取脱细胞软骨,两者共同培养以构建新型软骨组织,为临床修复器官缺损及再造提供实验基础。 材料与方法 创建新西兰兔创伤模型,提取兔外周血间充质干细胞,体外行干细胞原代培养、传代、冻存、复苏及诱导分化成软骨。体外诱导培养生长良好的第三代间充质干细胞14d获得软骨种子细胞,显微镜下观察各期细胞生长特性及形态特征,制作种子细胞爬片行甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫细胞化学:联合中性去垢剂—酶法获得同种异体兔肋软骨脱细胞支架,制备石蜡切片行HE染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫细胞化学,镜下观察染色结果;制备扫描电镜样本,扫描电镜下观察支架形态与结构。自体间充质源性软骨种子细胞与异体脱细胞软骨体外复合培养7d获得复合软骨,将复合软骨植入自体实验兔皮下,根据植入材料的差异分为A、B、C、D四组(A组:植入异体新鲜软骨B组:植...
【文章页数】:60 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
Abstract
符号说明
前言
实验一 兔外周血间充质干细胞体外分离培养冻存及分化成软骨特性的实验研究
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
实验二 兔肋软骨脱细胞基质的制备
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
实验三 间充质源性软骨种子细胞复合脱细胞软骨构建软骨组织的实验研究
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
讨论
结论
附图
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文
学位论文评阅及答辩情况表
本文编号:4016345
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【学位级别】:硕士
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Abstract
符号说明
前言
实验一 兔外周血间充质干细胞体外分离培养冻存及分化成软骨特性的实验研究
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
实验二 兔肋软骨脱细胞基质的制备
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
实验三 间充质源性软骨种子细胞复合脱细胞软骨构建软骨组织的实验研究
1 实验材料
2 实验方法
3 实验结果
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