骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架的细胞毒性评估

发布时间：2025-02-11 11:12

　　 背景:作为骨组织工程的修复材料,应具有良好的生物相容性及降解吸收性,许多学者在此方面也做了较深入的研究,但中药复合细胞生物支架的研究较少。目的:参照《医疗器械生物学评价标准》,对兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸生物复合支架进行体外细胞毒性检测,评估复合支架的毒性等级,为临床应用生物支架提供实验依据。方法:依照ISO标准按"材料面积∶浸提介质体积=3-6 cm²:1 mL"制作骨髓间充质干细胞-海螵蛸生物复合支架材料浸提液。制备L-929细胞悬液,将细胞浓度调整至1×10～7L^-1进行接种培养,设置阳性对照组（含苯酚的DMEM培养液）、实验组（材料浸提液）、阴性对照组（新鲜DMEM培养液）。培养24,48,72 h采用MTT法检测L-929细胞吸光度值,计算各组细胞的相对增殖率,评估复合支架毒性等级。结果与结论:实验组、阴性对照组、阳性对照组吸光度值在不同时间点不完全相同（P=0.000 <0.01）,各时间点内比较,实验组与阴性对照组吸光度值均明显高于阳性对照组（P<0.01）;兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸生物支架细胞毒性为1级。结果说明...

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图1 骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架

骨髓间充质干细胞复合海螵蛸支架(课题组前期制备)[10]，见图1;L-929细胞(贵阳中医学院基础实验中心)；DMEM培养液(Hyclone公司)；胎牛血清、0.25%胰蛋白酶(Gibco公司)；CO2培养箱(美国AHELDON公司)；苯酚(上海国药集团)；四甲基偶氮唑盐(天津S....

图2 不同时间点各组细胞相对增殖率

课题组将祖国传统中医药与前沿骨组织工程学相结合，寻求细胞/中药支架复合材料构建的可行性，课题组对兔骨髓间充质干细胞-海螵蛸复合支架材料做过系列研究[10,17]，检测出海螵蛸孔隙率>80%，孔径>100μm有利于血管、营养物质的渗入及新生骨组织的形成，且其内部所含的甲壳素成分有利....

本文编号：4033178