深低温停循环对大鼠海马线粒体通透性转化孔骨架蛋白的影响

发布时间：2017-06-29 09:22

  本文关键词：深低温停循环对大鼠海马线粒体通透性转化孔骨架蛋白的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]研究深低温停循环对大鼠海马线粒体通透性转化孔(mPTP,Mitochondrial permeablity transition pore)的影响和低温通过抑制线粒体介导的细胞凋亡途径起到脑保护性的作用机制。[方法]方法35只大鼠经随机分三组(其中5只为预灌注血液供体)后采体外插管法建立大鼠闭胸式体外循环模型,三组动物分别经深低温停循(DHCA,Deep Hypothermic Circulatory Arrest), n=10,脑浊20℃-24℃,停循环 10分钟；常温停循环(NTCA, Normal Temperature Circulatory Arrest), n=10,脑温36℃～37℃,停循环10分钟；常温不停循环(NC, Normal Control)n=10,脑温36℃～37℃。经循环后快速断头取海马,液氮保存。提取海马组织线粒体的蛋白质和RNA做通透性转化孔相关蛋白的蛋白质表达水平和基因表达水平检测。实验所得数据用均数±标准差(x±s)表示,采用完全随机设计的单因素方差分析,多样本均数间的比较采用q检验,以P0.05为差异有统计学意义,当P0.05,要了解那些组有差异要做两样本之间的t检验,P0.05差异有统计学意义。[结果]线粒体通透性转化孔的骨架蛋白VDAC (voltage-dependent anion channel)三种亚(VDAC1*、VDAC2、VDAC3、ANT(Adenine nucleotide transporter、CYPD(Cyclophilin D)在深低温停循环组和常温停循环组中的表达量较空白对照组均升高,差异有统计学意义(P0.05)；在深低温停循环组中的表达量较常温停循环组的表达量低,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]缺血缺氧可诱导大鼠海马组织的线粒体通透性转化孔的骨架蛋白的表达量增加和通道的开放进而引起神经元细胞的凋亡,而深低温在相同的缺血缺氧时间条件下可以减少骨架蛋白量的表达,并抑制通道的开放,从而抑制神经元细胞的凋亡而达到脑保护的作用。
【关键词】：闭胸式体外循环深低温停循环电压依赖性阴离子通道腺嘌呤核苷酸转运蛋白亲环蛋白D线粒体凋停亡线粒体通透性转化孔
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R318.52
【目录】：

• 中英文缩写词表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-15
• 参考文献12-15
• 第一部分 建立大鼠闭胸式体外循环模型及验证15-26
• 一. 主要试剂15
• 二. 主要器材和设备15-16
• 三. 实验分组16
• 四. 建立模型16-19
• 五. 结果19-23
• 六. 讨论23-25
• 七. 结论25-26
• 第二部分 海马组织线粒体提取和膜电位检测26-32
• 一. 主要设备及试剂26
• 二. 提取线粒体及验证26-27
• 三. 纯化线粒体膜电位检测27-28
• 四. 结果28-31
• 五. 结论31-32
• 第三部分 海马线粒体通透性转化骨架蛋白的基因和蛋白质表达水平检测32-45
• 一. 设备及试剂32
• 二. 主要试剂32-33
• 三. 海马组织RNA提取及RT-PCR33-36
• 四. 蛋白质检测western-blotting36-40
• 五. 实验结果及分析40-44
• 六. 实验结果总结44-45
• 讨论45-51
• 结论51-52
• 参考文献52-56
• 综述56-63
• 参考文献60-63
• 攻读学位期间发表论文63-64
• 致谢64

【参考文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 郭虹霞;亲环素Cyclophilin D（CypD）选择性小分子抑制剂筛选以及小分子对依赖Ca2+的线粒体形态功能的影响[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2005年

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本文编号：497385