IL-1β对人牙龈成纤维细胞在不同钛板表面表达炎性因子的影响

发布时间：2017-08-14 04:14

  本文关键词：IL-1β对人牙龈成纤维细胞在不同钛板表面表达炎性因子的影响

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【摘要】：目的：通过探讨IL-1β的诱导下,对不同钛板表面牙龈成纤维细胞对炎性因子的表达,以及比较不同的钛金属表面结构组分对HGF的贴附增殖的影响。方法：实验1、对牙龈成纤维细胞进行原代培养(组织块培养法),荧光倒置显微镜下观察细胞的生长状态。取第3代人牙龈成纤维细胞进行试验研究,用血球计数板计数法记录细胞的生长曲线,用免疫组化染色法以鉴定细胞来源。实验2、将消毒备用的钛板置于24孔培养板中,将牙龈成纤维细胞接种在三种不同表面处理的钛板上,分别在2 h后用MTT法检测牙龈成纤维细胞在不同表面处理的钛片种植体表面的贴附率,在5 d后用MTT法检测牙龈成纤维细胞在不同表面处理的钛片种植体表面的增殖率。实验3、第一组,将消毒备用的钛板置于24孔培养板中,将牙龈成纤维细胞接种在三种不同表面处理的钛板上,培养2 d后分别在3h、6h、24h后用聚合酶链反应(PCR)检测炎性因子IL-6以及IL-8的表达量。第二组,将消毒备用的钛板置于24孔培养板中,将牙龈成纤维细胞接种在三种不同表面处理的钛板上,培养2d后加入刺激因素IL-1p,分别在3h、6h、24h后用聚合酶链反应(PCR)检测炎性因子IL-6以及IL-8的表达量。实验数据采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果：1、免疫组化结果表明HGF角蛋白染色阴性,波形丝蛋白染色阳性,说明细胞来源于中胚层,而非上皮来源。细胞生长曲线呈"S"型,接种后24h内细胞略减少,24 h之后细胞生长速度加快,之后生长速度逐渐减缓,进入平台期,第七天细胞生长速度明显减慢。2、MTT法测得2h、5d后后纯钛、钛合金表面两种金属细胞附着率、增殖率无显著性差异(P0.05),与钛表面氮化处理钛板细胞附着率、增殖率有显著性差异(P0.05)。3、在IL-1β的诱导下,牙龈成纤维细胞对炎性因子(IL-6、IL-8)的表达量明显增加；纯钛与钛合金的钛板比表面氮化处理的钛板产生炎性因子(IL-6、IL-8)的表达量相对较少。结论：1、人牙龈成纤维细胞原代培养组织块培养法细胞成活率高,可培养出足够的细胞,细胞活性强,性状稳定。2、纯钛组、钛合金组牙龈成纤维细胞的贴附与增殖均良好,氮化钛组牙龈成纤维细胞的贴附与增殖被抑制(P0.05)3、在IL-1p的诱导下,炎性因子可以得到高度表达；纯钛和钛合金这两种表面组分IL-6、IL-8表达量较少,在临床操作过程中,纯钛和钛合金表面组分种植体被广泛应用。
【关键词】：牙龈成纤维细胞 钛片 IL-1β IL-6 IL-8
【学位授予单位】：滨州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R783.1
【目录】：

• 前言3-4
• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 缩略词9-10
• 第一部分 人牙龈成纤维细胞(HGF)的培养和鉴定10-15
• 前言10
• 材料方法10-12
• 结果12-13
• 讨论13-14
• 结论14-15
• 第二部分 实验用钛板表面的不同处理及检测15-18
• 前言15
• 材料方法15
• 结果15-17
• 讨论17
• 结论17-18
• 第三部分 牙龈成纤维细胞在不同表面处理的钛片种植体表面贴附率与增殖率18-23
• 前言18
• 材料方法18-19
• 结果19-21
• 讨论21
• 结论21-23
• 第四部分 IL-1β诱导牙龈成纤维细在不同钛板表面产生IL-6和IL-8的基因表达23-32
• 前言23
• 材料方法23-27
• 结果27-30
• 讨论30-31
• 结论31-32
• 参考文献32-35
• 附图35-38
• 综述38-46
• 参考文献42-46
• 致谢46-47
• 硕士期间发表的论文47

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4 唐昊U，

本文编号：670682