GABA_B受体变构调节剂CGP7930构效关系的研究

发布时间：2017-08-23 09:01

  本文关键词：GABA_B受体变构调节剂CGP7930构效关系的研究

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【摘要】：γ-氨基丁酸(γ-gammaaminobutyricacid，GABA)是最为重要的神经递质，主要在脊椎动物中枢神经系统中发挥抑制性作用，调节许多重要的生理进程。代谢型γ-氨基丁酸受体GABA_B受体与代谢型谷氨酸受体、钙敏感受体、信息素受体和味觉受体等同属于G蛋白偶联受体家族C，介导缓慢的、长时间的突触抑制效应。GABA_B受体是最具有药理学意义的药物靶点之一，具有精细和复杂的调控机制，过度抑制和激活都会导致各种疾病的发生。GABA_B受体传统的靶点药物开发集中于激动剂和拮抗剂，然而这类药物在临床应用上受到许多的限制，如机体药物代谢困难、较强的副作用、耐药性差等等。变构调节剂结合于天然配体结合位点之外，能够调节异源二聚体亚基或结构域间的相互作用，并具有较高的特异性和药物安全性，同时还能够保持GABA_B受体信号在时间和空间上的可控性。因此变构调节剂为GABA_B受体靶点药物开发提供了新思路。 本文主要针对GABA_B受体变构调节剂小分子化合物的高通量筛选和作用分子机制的研究。目前针对GABA_B受体的变构调节剂的研究尚仅仅集中于CGP7930(2001)、GS39783(2003)、BHF177(2008)、CMPPE(2011)四种正向变构调节剂，而且负向变构调节剂还未见报道。通过与上海国家新药筛选中心(NCDS)的合作，由新药筛选中心运用组合化学的方法以CGP7930为母核改造并合成了多种小分子化合物。我们通过放射性IP3功能检测技术对小分子化合物进行药物筛选，并构建CGP7930构效关系图谱。 我们使用工具细胞人胚肾细胞HEK293，进行电穿孔转染GB1、GB2及Gqi9质粒，孵育[3H]myo-inositol后，50μM药物与不同浓度GABA同时刺激细胞，用50μMCGP7930与不同浓度GABA同时刺激细胞作为正对照，不同浓度的GABA单独刺激作为负对照，然后进行放射性IP3功能检测。从合成的小分子化合物库中挑选15种在结构上具有代表性和规律性的小分子化合物，15种小分子化合物分别在R1、R2、R3、R4、R5共5个基团位置进行改造。根据改造后的小分子化合物放射性IP3功能检测的结果，分别总结出了R1-R5不同基团位置的作用，并成功构建出了CGP7930构效关系图谱。并推测R1基团位置的羟基和R2基团位置的两个叔丁基支链是CGP7930识别GB2亚基位点所必需的；在CGP7930三维结构中，R5基团位置碳原子所连接的基团对CGP7930的变构调节活性有关键的影响，改变该位置结构可能会使CGP7930的特性发生改变，从而筛选获得更加高效和不同特性的药物。 总之，我们对GABA_B受体变构调节剂CGP7930构效关系图谱的建立，对我们下一步的改造优化提供了依据，，同时对GABA_B受体新药研发奠定了基础。
【关键词】：GABA_B受体 CGP7930 构效关系 药物筛选 变构调节剂
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.04
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 1 绪论9-26
• 1.1 GABA_B受体结构、定位和分布9-13
• 1.2 GABA_B受体激活机制13-15
• 1.3 GABA_B受体介导的下游信号通路及生理意义15-19
• 1.4 GABA_B受体变构剂药学及变构剂CGP793019-24
• 1.5 本研究的目的，内容和意义24-26
• 2 实验技术原理26-30
• 2.1 电穿孔转染26-27
• 2.2 IP3功能检测技术27-28
• 2.3 组合化学 (COMBINATORIAL CHEMISTRY)28-30
• 3 材料与方法30-36
• 3.1 实验材料30-31
• 3.2 实验方法31-36
• 4 实验结果与讨论36-53
• 4.1 结果与分析36-50
• 4.2 讨论与展望50-53
• 致谢53-54
• 参考文献54-59
• 附录 主要符号和缩略词表59

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 金义超;王桂松;;γ-氨基丁酸能系统在阿片类药物及可卡因成瘾中的作用机制研究进展[J];立体定向和功能性神经外科杂志;2011年06期

2 蒋明;黄思罗;林昕;春雷;皮振钧;孙兵;张文华;赵菡;刘剑峰;;GABA_B受体变构剂药学研究进展[J];现代生物医学进展;2011年14期

3 张文华;孙倩;胡勇箭;刘剑峰;;GABA_B受体与跨膜受体交叉对话研究新进展[J];生物物理学报;2013年10期

4 杨泽伟;王龙海;朱莉;郎志宏;罗学刚;;γ-氨基丁酸代谢旁路在植物响应逆境胁迫中的作用机制研究[J];生物技术进展;2014年02期

5 陈锋;Andrew J Lawrence;梁建辉;;酒精滥用与成瘾中枢神经递质的研究进展[J];中国药物依赖性杂志;2007年01期

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中国博士学位论文全文数据库 前4条

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3 蔡洪信;白香丹胶囊对肝气逆证大鼠海马GABA_B受体表达及其G蛋白偶联的离子通道和信号通路的影响[D];山东中医药大学;2012年

4 朱槞槞;频率和时间模式依赖的海马突触可塑性及其机制研究[D];中国科学技术大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前9条

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本文编号：724124