光诱导SNP的NO释放及其生物学应用研究

发布时间：2017-09-21 11:01

  本文关键词：光诱导SNP的NO释放及其生物学应用研究

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【摘要】：一氧化氮(NO)作为一种重要的信号分子,在多种生理生化过程包括血压的控制、神经系统的传输、免疫响应以及细胞凋亡等作用中都发挥着十分显著的作用。随着生物医学和疾病治疗方法的发展,光动力疗法已经成为继手术、放疗、化疗等传统方法之后的治疗肿瘤的另一种新型的技术手段。同时,光诱导NO的释放引起研究者的关注。开发适当的外源性NO供体,如何控制NO的定量释放,如何将NO输送到特定部位等问题成为亟待解决的重要问题。目前已经有多种NO的外源供体被应用于临床。硝普钠(Na2[Fe(CN)5NO]·2H2O, SNP)就是临床上常用的一种舒张血管的药物和NO供予体,对于血压的调节有着十分重要的作用。在本文中,我们通过实验总结和分析了光诱导SNP在溶液中NO自由基释放的动力学过程,通过电子顺磁共振谱(ESR)证实了光诱导SNP的NO释放；利用NO自由基捕捉技术测定得到了NO自由基的特征信号；利用NO选择性电极测定技术检测了光激发SNP释放NO量的多少,初步获得了定量调控NO释放的基本方法；研究了在光照条件下,SNP与生物大分子DNA之间的相互作用,并分析了其中可能的作用机制；研究了光照条件下,SNP对肿瘤细胞生长的抑制情况,为光诱导SNP细胞生物学效应的分子机制研究和临床应用,提供了新的依据。本文的内容主要由以下五部分构成：第一：介绍了近年来有关光动力疗法的研究进展、综述了国内外有关NO的研究动态以及SNP的理化性质和在生物学研究中的重要作用意义。第二：利用电子自旋共振技术(ESR)和NO自由基捕捉技术,证实了光诱导SNP溶液中NO的释放；利用NO选择性电极测定方法,定量测定了不同波长的光激发条件下,SNP在溶液中NO的释放量,获得了利用光激发调控SNP溶液中NO释放量的基本方法。第三：通过琼脂糖凝胶电泳法研究了在光照条件下,SNP对pBR322DNA的切割作用,并分析了其作用机制。第四：利用CCK-8法检测了不同浓度的SNP在光照和未光照条件下对三种人源肿瘤细胞(Hela、HepG2和MCF-7)生长的抑制作用,为疾病治疗新方法的研究提供了新的线索。第五,总结全文并对下一步工作进行展望。
【关键词】：硝普钠 光动力疗法 一氧化氮 DNA 细胞
【学位授予单位】：山西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R454.2
【目录】：

• 中文摘要8-9
• ABSTRACT9-11
• 第一章 绪论11-17
• 1.1 课题研究目的和意义11
• 1.2 课题研究现状11-15
• 1.2.1 光动力疗法11-12
• 1.2.2 NO的研究现状12-13
• 1.2.3 硝普钠的作用及性质13-15
• 1.3 本论文主要内容和贡献15-17
• 第二章 光诱导SNP在溶液中NO的释放17-31
• 2.1 引言17-18
• 2.2 电子自旋共振(ESR)技术检测NO18-22
• 2.2.1 电子自旋共振(ESR)技术基本原理18-19
• 2.2.2 自旋捕集技术19
• 2.2.3 实验仪器和试剂19-20
• 2.2.4 ESR波谱测定20
• 2.2.5 结果与讨论20-22
• 2.3 照射光源的构建22
• 2.4 SNP的吸收光谱测定22
• 2.4.1 实验仪器22
• 2.4.2 吸收光谱测定22
• 2.5 NO选择性电极测定22-29
• 2.5.1 NO选择性电极测定原理23
• 2.5.2 实验仪器和试剂23-24
• 2.5.3 主要仪器和软件介绍24-25
• 2.5.4 NO电极的安装25
• 2.5.5 NO电极的校准25-26
• 2.5.6 溶液中NO实时测量条件的优化26-29
• 2.5.7 讨论29
• 2.6 本章总结29-31
• 第三章 光诱导SNP对DNA的切割作用31-39
• 3.1 引言31-33
• 3.2 琼脂糖凝胶电泳法33-37
• 3.2.1 实验原理33-34
• 3.2.2 实验仪器和试剂34-35
• 3.2.3 实验过程35
• 3.2.4 实验结果及分析35-37
• 3.3 本章总结37-39
• 第四章 光诱导SNP对肿瘤细胞生长的抑制作用39-51
• 4.1 引言39
• 4.2 检测方法39-40
• 4.2.1 CCK-8法及原理39
• 4.2.2 CCK-8法的优势39-40
• 4.3 细胞培养实验40-45
• 4.3.1 实验仪器和试剂40-41
• 4.3.2 试剂配置41
• 4.3.3 细胞培养41-42
• 4.3.4 CCK-8法检测SNP对三种细胞生长的影响42
• 4.3.5 实验结果及分析42-45
• 4.4 膜片钳实验的准备45-49
• 4.4.1 膜片钳技术简介45-46
• 4.4.2 实验所用材料46
• 4.4.3 溶液的配制46-47
• 4.4.4 实验操作步骤47-49
• 4.5 本章总结49-51
• 第五章 总结与展望51-53
• 参考文献53-59
• 攻读学位期间取得的研究成果59-60
• 致谢60-61
• 个人简况及联系方式61-62
• 承诺书62-63

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 钱毅;李建平;;一氧化氮的肿瘤生物学效应[J];中国现代手术学杂志;2011年04期

2 彭金娥;潘敬新;;一氧化氮在肿瘤治疗中的多重作用[J];肿瘤;2012年01期

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本文编号：894130