角膜修复用丝素蛋白复合膜的研究

发布时间：2017-09-21 21:16

  本文关键词：角膜修复用丝素蛋白复合膜的研究

  更多相关文章： 丝素蛋白 复合膜 细胞毒性 细胞相容性 角膜修复

【摘要】：丝素蛋白因其具有良好的生物相容性和可控的降解速率,被广泛应用在组织修复、支架材料、药物缓释和伤口敷料等生物医药领域。另外,丝素蛋白具有很强的可塑性,可加工成纤维、凝胶、薄膜、微球等形态。然而纯丝素蛋白膜因为易溶于水、柔韧性差等缺点,在生物医学领域的应用受到限制。本课题将亲水性小分子吡咯烷酮衍生物或氨基甲酸酯类化合物与丝素蛋白溶液进行复合,制备丝素蛋白复合膜。通过X-射线衍射法研究小分子对于丝素蛋白结构的影响,结果表明,小分子可以诱导丝素蛋白形成结晶结构,加入量的不同形成结晶结构的类型也不同。而高分子聚乙烯吡咯烷酮与丝素蛋白相容性差,没有改善丝素膜的结构和性能。使用酶标仪测试了丝素蛋白复合膜的透光率,结果显示,复合膜具有较好的透光性,尤其是氨基甲酸酯/丝素蛋白复合膜,其透光率达到95%以上。对复合膜的溶失率测试发现,小分子诱导形成的复合膜大大降低了丝素蛋白溶失率,使其不溶于水。力学性能的研究结果表明,吡咯烷酮或氨基甲酸酯的加入大大提高了丝素膜的柔韧性,断裂强度也达到角膜修复材料的应用要求。采用浸提液法研究了复合膜细胞毒性,结果表明单体乙烯基吡咯烷酮与丝素蛋白的复合膜具有细胞毒性,其他的吡咯烷酮类与丝素蛋白的复合膜细胞毒性较小,氨基甲酸酯类与丝素蛋白的复合膜没有细胞毒性,可以用于角膜修复或替代材料。提取兔角膜基质细胞,种植于复合膜上,通过体外培养,研究了复合膜上兔角膜基质细胞的增殖情况,结果发现,兔角膜基质细胞可以在复合膜上正常生长增殖,吡咯烷酮类复合膜和氨基甲酸脂类复合膜有望成为一种新的角膜修复材料。
【关键词】：丝素蛋白 复合膜 细胞毒性 细胞相容性 角膜修复
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R318.08;TQ93
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 引言10-17
• 1.1 再生家蚕丝素蛋白的组成及结构10-11
• 1.2 丝素蛋白的生物学特性11-12
• 1.3 丝素蛋白材料在角膜组织工程中的应用12-15
• 1.3.1 角膜组织工程的研究进展12-14
• 1.3.2 丝素蛋白材料用于角膜组修复的研究现状14-15
• 1.4 本文研究的内容与目的15-17
• 第二章 吡咯烷酮/丝素蛋白复合膜的研究17-39
• 2.1 材料与仪器17-18
• 2.1.1 实验材料17-18
• 2.1.2 实验仪器18
• 2.2 实验方法18-20
• 2.2.1 丝素溶液的制备18
• 2.2.2 丝素蛋白复合膜的制备18-19
• 2.2.3 丝素蛋白复合膜结晶结构的测定19
• 2.2.4 丝素蛋白复合膜透光率的测定19
• 2.2.5 丝素蛋白复合膜溶失率的测定19-20
• 2.2.6 丝素蛋白复合膜的力学性能20
• 2.3 结果与讨论20-38
• 2.3.1 复合膜结晶结构分析20-25
• 2.3.2 丝素蛋白复合膜的透光率25-29
• 2.3.3 丝素蛋白复合膜的含水率29-30
• 2.3.4 丝素蛋白复合膜的溶失率30-32
• 2.3.5 丝素蛋白复合膜的力学性能32-38
• 2.4 本章小结38-39
• 第三章 乙烯基吡咯烷酮及聚乙烯吡咯烷酮丝素蛋白复合膜的研究39-51
• 3.1 材料与仪器39-40
• 3.1.1 实验材料39-40
• 3.1.2 实验仪器40
• 3.2 试验方法40
• 3.2.1 丝素溶液的制备40
• 3.2.2 丝素蛋白复合膜的制备40
• 3.2.3 丝素蛋白复合膜结晶结构的测试40
• 3.2.4 丝素蛋白复合膜透光率的测试40
• 3.2.5 丝素蛋白复合膜溶失率的测试40
• 3.2.6 丝素蛋白复合膜力学性能测试40
• 3.3 结果与讨论40-50
• 3.3.1 丝素蛋白复合膜的结晶结构40-42
• 3.3.2 丝素蛋白复合膜的透光率42-45
• 3.3.3 丝素蛋白复合膜的含水率45
• 3.3.4 丝素蛋白复合膜的溶失率45-48
• 3.3.5 丝素蛋白复合膜的力学性能48-50
• 3.4 本章小结50-51
• 第四章 氨基甲酸酯/丝素蛋白复合膜的研究51-62
• 4.1 材料与仪器51
• 4.1.1 实验材料51
• 4.1.2 实验仪器51
• 4.2 试验方法51-52
• 4.2.1 丝素溶液的制备51
• 4.2.2 丝素蛋白复合膜的制备51
• 4.2.3 丝素蛋白复合膜结晶结构的测试51-52
• 4.2.4 丝素蛋白复合膜透光率的测试52
• 4.2.5 丝素蛋白复合膜溶失率的测试52
• 4.2.6 丝素蛋白复合膜力学性能测试52
• 4.3 结果与讨论52-61
• 4.3.1 丝素蛋白复合膜的结晶结构52-54
• 4.3.2 丝素蛋白复合膜的透光率54-56
• 4.3.3 丝素蛋白复合膜的含水率56-57
• 4.3.4 丝素蛋白复合膜的溶失率57-58
• 4.3.5 丝素蛋白复合膜的力学性能58-61
• 4.4 本章小结61-62
• 第五章 不同丝素蛋白复合膜的细胞相容性62-72
• 5.1 材料与方法62-65
• 5.1.1 实验材料62
• 5.1.2 实验仪器62
• 5.1.3 兔角膜基质细胞的提取62-63
• 5.1.4 用于细胞毒性测试的丝素蛋白复合膜的制备63
• 5.1.5 丝素蛋白复合膜浸提液的制备63
• 5.1.6 用于细胞增殖活性测试的丝素蛋白复合膜制备63
• 5.1.7 使用L929细胞对丝素蛋白复合膜进行毒性测试方法63-64
• 5.1.8 丝素蛋白复合膜上角膜基质细胞增殖活性的测试64-65
• 5.2 结果与分析65-71
• 5.2.1 提取的角膜基质细胞培养65-66
• 5.2.2 细胞毒性测试结果分析66-68
• 5.2.3 角膜基质细胞在复合膜上的增殖情况68-71
• 5.3 本章小结71-72
• 第六章 结语72-74
• 6.1 全文结论72
• 6.2 本文主要研究成果72-73
• 6.3 今后进一步的研究计划73-74
• 参考文献74-80
• 攻读硕士研究生期间发表的论文80-82
• 致谢82-83

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