一种双层人工血管支架的构建及其生物相容性研究

发布时间：2017-09-23 16:19

  本文关键词：一种双层人工血管支架的构建及其生物相容性研究

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【摘要】：在临床应用中,虽然小直径血管(≤6咖)的需求量较大,但是在小直径(6mm)血管移植中,很多人工合成的组织工程血管支架的中远期效果并不好,常因其在低血流下缺乏内膜功能,形成血栓、动脉瘤、内膜增生而以失败告终。因此,寻找一种可以长期维持其在体内正常生理功能的组织工程血管支架的制作方法,成了目前小直径组织工程血管所需解决的一个重要问题,,而天然脱细胞血管的优势正是在于,除去细胞的细胞外基质具有如下特征：①为支架提供生物力学性能,并能够维持一定的强度和特定形状；②作为一个可供细胞增殖和迁移的生物活性支架；③可能会对细胞的表型及细胞行为产生调控；④作为一个锚定位点,为生长因子及各种酶或蛋白,提供特定的反应位点。本课题在实验室前期制备的RGD-蛛丝蛋白(Recombinant spider silk protein, pNSR32)、聚合物聚己内酯(polycaprolactone,PCL)、明胶(Gelatin, Gt)共同制备pNSR32/PCL/Gt小直径血管支架的基础上,引入生物相容性良好的天然细胞外基质,构建的脱细胞血管-(PCL/Gt/pNSR32)双层血管支架,以去垢剂处理法,蛋白酶处理法,去垢剂-酶联合处理法以及反复冻融法为基础,分别考察其对细胞的去除效果,通过冰冻切片,然后分别用苏木精-伊红染色,DAPI染色,DNA残留率测定等方法检测其脱细胞效率。结合本室已制备的RGD-蛛丝蛋白/PCL/Gt静电纺丝支架的基础上,应用静电纺丝技术制备pNSR32/PCL/Gt(5:85:10)电纺膜,同时,由含有0.25%戊二醛的10mmol/L的醋酸溶液与制备的脱细胞血管支架交联,分别交联6h、12h、24h(分别命名A、B、C组),构成层次明显,功能明显的双层血管支架材料。孔隙率结果显示交联制备的各组支架的孔隙率均符合国家标准,大于80%,与交联时间呈负相关性。同时支架的接触角也随着交联时间的增长而增大,说明其亲水性逐渐下降。另外,双层血管支架的缝合强度也随着交联时间的增加而增加,但是支架的断裂伸长率随着交联时间的增加而降低。最后对血液相容性的考察发现溶血实验中A组、B组、C组支架的溶血率分别为1.299%、1.818%、3.247%,均符合国家标准中溶血率小于5%的溶血要求：各实验组的双层血管支架的溶血率均低于4%,分别A组、B组、C组为1.299%、1.818%、3.247%,满足血管组织工程对于支架材料的溶血要求；复钙化凝血时间A、B两组更为优秀,且组间无统计学差异, A组支架与B组支架对于内源性凝血途径的抗凝性能相似,均优于C组支架；动态凝血时间测定实验与血小板黏附实验结果与前两项实验一致。综上可知,A组支架是三个实验组中抗凝血性能最为优良的支架。脱细胞血管支架一(PCL/Gt/RGD-蛛丝蛋白)双层血管支架的血液相容性随着戊二醛反应时间的延长而下降。总之,脱细胞血管支架/(PCL/Gt/RGD-蛛丝蛋白)双层血管支架抗凝血能力优异,具有较好的血管组织工程支架应用前景。
【关键词】：双层血管支架 RGD-蛛丝蛋白 脱细胞 戊二醛 静电纺丝 生物相容性
【学位授予单位】：福建师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R318.11
【目录】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-6
• 中文文摘6-11
• 绪论11-19
• 第一章 天然脱细胞血管支架的制备19-33
• 第一节 材料、仪器与试剂19-20
• 第二节 天然脱细胞血管支架制备方法20-21
• 第三节 脱细胞血管支架制备的脱细胞效果的评价21-22
• 第四节 实验结果22-29
• 第五节 讨论29-30
• 第六节 结论30-33
• 第二章 脱细胞血管支架-(PCL/Gt/RGD-蛛丝蛋白)双层血管支架的制备及其理化性能分析33-43
• 第一节 材料、仪器与试剂33-34
• 第二节 脱细胞血管支架/(PCL/Gt/RGD-蛛丝蛋白)双层血管支架的制备34-36
• 第三节 双层血管支架的力学性能评价36
• 第四节 实验结果36-40
• 第五节 讨论40-42
• 第六节 结论42-43
• 第三章 双层血管支架的生物相容性分析43-49
• 第一节 材料与仪器43
• 第二节 方法43-44
• 第三节 实验结果44-46
• 第四节 讨论46-47
• 第五节 结论47-49
• 第四章 结论49-50
• 本论文的创新之处50
• 本课题今后研究设想50-51
• 附录51-53
• 参考文献53-59
• 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果59-61
• 致谢61-63
• 个人简历63-65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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本文编号：906238