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新型力学加载式生物反应器研制及细胞培养试验研究

发布时间:2017-09-25 01:20

  本文关键词:新型力学加载式生物反应器研制及细胞培养试验研究


  更多相关文章: 生物反应器 动态表观弹性模量 三维支架 成骨细胞 压力加载


【摘要】:组织工程是利用工程学与生命学的原理和方法,研究人体组织/器官的形成和再生,即在体外构建出有生物活性的替代物,植入人体内,以修复或提高人体组织/器官的部分或全部功能。为使细胞在体外增殖、分化,以及提高细胞/支架结构物的力学性能,本文重点开发新型力学加载式生物反应器,并将其应用以研究力学刺激对体外三维支架培养下细胞生长的影响。这对构建组织替代物、指导临床诊断治疗、提高人类健康水平、发展经济具有重要意义。 本文首先研制一种用于对体外细胞施加力学刺激的新型力学加载式生物反应器。考虑细胞培养的特殊环境要求,本文从压电陶瓷的动态压缩加载、步进电机的动态剪切加载、差动螺旋机构的微调功能,以及可用于培养物弹性模量测定四个方面对装置进行了结构设计。基于ANSYS WORKBENCH有限元分析软件,分别对整体结构、差动螺旋机构和培养室等下端部件进行模态分析,以验证装置结构的合理性和可行性。针对动态压缩/剪切加载,分别设计和研究了压电陶瓷、步进电机的驱动控制策略。 其次,,建立装置的力学测试模型,依据该模型设计了数据采集系统,并对的多个支架的动态表观弹性模量进行测试及分析。应用应变仪简化装置实验系统,将其与数据采集系统对照,设计出用于细胞力学刺激培养的五种力学加载模式。 细胞培养方面,利用胶原蛋白对左旋聚乳酸支架材料进行表面改性,通过细胞相容性实验对支架的改性结果进行验证分析。然后应用可在线监测的力学加载式生物反应器,分别对体外三维支架培养的成骨细胞进行不同频率和不同应变的动态力学加载实验。结合MTT比色法,对比分析加载条件对细胞增殖的影响。利用原子力显微镜,对加载后的细胞进行形态学观察及分析。
【关键词】:生物反应器 动态表观弹性模量 三维支架 成骨细胞 压力加载
【学位授予单位】:哈尔滨工业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R318.6
【目录】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-8
  • 第1章 绪论8-18
  • 1.1 课题背景及研究的目的和意义8-9
  • 1.2 国内外研究现状及分析9-17
  • 1.2.1 骨组织工程发展现状及趋势9-11
  • 1.2.2 生物反应器研究现状11-16
  • 1.2.3 研究现状分析16-17
  • 1.3 本文的主要研究内容17-18
  • 第2章 力学加载式生物反应器设计及模态分析18-32
  • 2.1 力学加载式生物反应器的总体方案设计18-20
  • 2.2 力学加载式生物反应器的结构设计20-24
  • 2.2.1 动态压缩加载部件设计22
  • 2.2.2 动态剪切加载部件设计22-23
  • 2.2.3 差动螺旋机构设计23-24
  • 2.3 基于 ANSYS WORKBENCH 有限元软件的模态分析24-29
  • 2.3.1 力学加载式生物反应器的模态分析简介24
  • 2.3.2 力学加载式生物反应器的 Pro/E 建模24-25
  • 2.3.3 力学加载式生物反应器整体结构模态分析25-26
  • 2.3.4 差动螺旋机构模态分析26-28
  • 2.3.5 培养室等下端部件模态分析28-29
  • 2.4 动态压缩/剪切加载的驱动控制设计29-30
  • 2.4.1 基于驱动电源系统的动态压缩加载控制29
  • 2.4.2 基于单片机系统的动态剪切加载控制29-30
  • 2.5 本章小结30-32
  • 第3章 测试系统设计及支架材料力学性能分析32-46
  • 3.1 力学测试模型的建立32-33
  • 3.2 数据采集系统设计33-38
  • 3.2.1 位移、力传感器的选用34-36
  • 3.2.2 信号采集流程设计36-37
  • 3.2.3 数据采集卡及系统软件37-38
  • 3.2.4 采集参数标定38
  • 3.3 支架材料的动态力学性能测试38-42
  • 3.3.1 实验机力传感器的刚度测试38-40
  • 3.3.2 支架动态表观弹性模量测试及分析40-42
  • 3.4 基于应变仪监测系统的几种力学加载模式42-44
  • 3.5 本章小结44-46
  • 第4章 三维支架培养下的成骨细胞压力加载实验研究46-63
  • 4.1 左旋聚乳酸(PLLA)三维支架材料的胶原蛋白改性46-48
  • 4.1.1 PLLA 多孔支架制造技术46-48
  • 4.1.2 胶原蛋白对 PLLA 支架的表面改性48
  • 4.2 改性 PLLA 的细胞相容性实验研究48-53
  • 4.2.1 实验准备48-49
  • 4.2.2 SV40 hFOB1.19 转染人成骨细胞株复苏与传代培养49-50
  • 4.2.3 成骨细胞接种50-51
  • 4.2.4 改性 PLLA 支架的细胞相容性实验51-52
  • 4.2.5 改性 PLLA 支架的相容性结果及分析52-53
  • 4.3 不同频率动态加载对体外成骨细胞培养的实验研究53-57
  • 4.3.1 不同频率的动态加载下体外成骨细胞培养方法54-56
  • 4.3.2 不同频率刺激下细胞培养实验结果及分析56-57
  • 4.4 不同动态压应变下成骨细胞体外培养实验研究57-61
  • 4.4.1 成骨细胞的力学加载实验57-59
  • 4.4.2 基于原子力显微镜(AFM)的加压细胞形态学检测59
  • 4.4.3 不同动态压应变下成骨细胞培养结果及分析59-60
  • 4.4.4 基于原子力显微镜的成骨细胞形态学观察60-61
  • 4.5 本章小结61-63
  • 结论与展望63-64
  • 参考文献64-68
  • 攻读硕士期间发表的论文及其它成果68-70
  • 致谢70

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本文编号:914548

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