新型盆底补片生物学评价的实验研究

发布时间：2017-10-04 10:41

  本文关键词：新型盆底补片生物学评价的实验研究

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【摘要】：目的：检测新型生物交联剂京尼平对猪脱细胞膀胱(urinary bladder matrix，UBM)体外生物学性能的影响及补片植入实验动物家兔腹部和阴道后生物相容性和生物力学性能，为新型的盆底功能重建补片的临床应用提供前期试验依据。 方法： ①采用表面活性剂+酶消化法对猪膀胱进行脱细胞处理后，用0.625%京尼平溶液交联UBM72小时。通过HE染色及扫描电镜进行组织形态观察，并对交联前后的脱细胞猪膀胱进行厚度、吸水性、体外胶原酶降解性能以及生物力学性能检测，以L929细胞为实验细胞，采用MTT法评估材料的细胞毒性。 ②将家兔分为6组，每组15只，分别将UBM(A)、交联型UBM(B)、聚丙烯网片(C)、复合交联型UBM(D)、复合UBM(E)，植入家兔腹壁，以假手术组为对照。分别于植入后1,2,4,8,12周取材,通过HE染色进行组织学观察，采用RT-PCR技术动态检测IFN-γ, IL-2, IL-4及IL-10mRNA的表达水平。 ③健康雌性新西兰大白兔40只，随机分为2组。分别将聚丙烯网片、京尼平交联型UBM植入家兔的腹直肌表面及阴道直肠间隙，植入12周时取材，进行组织学反应和生物力学性能评估。 结果： ①京尼平交联猪脱细胞膀胱后呈深蓝色，保持了天然组织构架的完整，胶原纤维更加致密，，吸水性提高，力学性能良好，UBM在抗酶解实验第7天已完全降解，交联型UBM在第28天降解率2%。交联前后UBM的细胞毒性为0～1级。 ②两复合材料组均出现侵蚀反应，复合UBM材料组炎症评分显著高于其他各组(P＜0.05)；聚丙烯网片组新生血管形成、成纤维细胞增殖评分高于其他各组(P＜0.05)；各材料组成纤维细胞增殖显著高于假手术组(P＜0.05)。UBM材料降解速度最快，术后12周时UBM材料完全降解，而交联型UBM材料无降解。交联型UBM材料组的IFN-γ, IL-2, IL-4及IL-10mRNA的表达水平在每个观察时间点上均与假手术组接近。 ③聚丙烯阴道组有50%出现侵蚀反应，聚丙烯腹部组及交联型UBM组未见侵蚀现象。植入阴道的聚丙烯补片有33%消失，腹部的聚丙烯补片全部可见；植入腹部的交联型UBM补片有6%消失，阴道的交联型UBM补片有53%消失。所有补片和腹直肌或阴道粘膜均有粘连，补片不同程度的收缩；聚丙烯补片粘连更致密收缩更明显。 ④将两个植入部位累加统计，与聚丙烯比较，交联型UBM诱导慢性炎症反应轻，炎症评分低(P=0.021)，新生血管形成(P=0.000)和成纤维细胞增殖(P=0.008)评分更高。从植入部位观察，聚丙烯阴道组比腹部组有更高的炎症反应评分(P=0.001)，而新生血管形成和成纤维细胞增殖无显著差异(P0.05)。 ⑤京尼平交联型UBM植入腹部和阴道12周后，力学性能无下降，而聚丙烯植入阴道后抗拉强度增强、弹性模量增加。两种材料植入同一部位比较，腹部植入后，聚丙烯的抗拉强度、断裂伸长率、断裂强度均高于交联型UBM(P＜0.05)，但两者的弹性模量无统计学差异(P＞0.05)；阴道植入后，聚丙烯的抗拉强度、断裂强度高于交联型UBM(P＜0.05)，两者的断裂伸长率、弹性模量无统计学差异(P＞0.05)。 结论： ①经天然交联剂京尼平交联的脱细胞猪膀胱吸水性好，具有良好的生物力学性能，抗酶解能力强且无细胞毒性，是一种较为理想的盆底重建材料。 ②交联型脱细胞膀胱植入体内后降解慢、组织反应轻、免疫原性低，生物相容性好、与阴道整合佳、生物力学性能保持良好,是潜在良好的盆底重建材料。
【关键词】：脱细胞膀胱 补片 京尼平 交联
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R318.08
【目录】：

• 缩略语表4-5
• Abstract5-8
• 摘要8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 材料的制备和体外性能检测12-20
• 2.1 材料与方法12-14
• 2.2 结果14-18
• 2.3 讨论18-20
• 第三章 补片家兔腹部埋植模型的生物相容性研究20-31
• 3.1 材料与方法20-22
• 3.2 结果22-28
• 3.3 讨论28-31
• 第四章 补片家兔腹部及阴道埋植模型的组织学反应和生物力学性能研究31-40
• 4.1 材料与方法31-34
• 4.2 结果34-38
• 4.3 讨论38-40
• 全文总结40-41
• 参考文献41-47
• 文献综述 生物补片及其在盆底重建手术中的应用进展47-55
• 参考文献51-55
• 攻读硕士期间主要科研成果55-56
• 致谢56

【参考文献】

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本文编号：970210