健脑益智胶囊对TBI后大鼠学习记忆及海马区CaMKⅡ表达的影响

发布时间：2017-05-10 20:58

  本文关键词：健脑益智胶囊对TBI后大鼠学习记忆及海马区CaMKⅡ表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过观察不同干预条件下不同组别的颅脑损伤(Traumatic brain injuries,TBI)后大鼠空间辨别性学习记忆能力改变,海马神经元形态改变及Ca MKⅡ表达的影响,进一步探讨基于“豁痰化瘀利水”大法的健脑益智胶囊对TBI后大鼠空间辨别性学习记忆能力改变以及海马神经元形态改变、Ca MKⅡ的表达是否具备干预效应。方法:选SD大鼠(8周龄)180只,随机划分为5大组,分别为A(假手术组)、B组(模型组)、C组(中药组)、D组(脑复康组)、E组(空白组)。单组按采集脑组织标本的时序分为例如A1-A5的亚组;造模均采用电子颅脑损伤仪(e CCI)进行TBI造模,A组(颅骨钻孔术后见完整硬膜,不打击);B组(造模后常规喂养,不予处理);C组(造模后,给以中药健脑益智胶囊灌胃,给药3次/日,配置规格:0.75g/ml混悬液);D组(造模后,给以西医脑复康片灌胃,给药3次/日,配置规格:0.09g/ml混悬液);E组(仅给予常规喂养)。运用行为学检查法水迷宫(Morris water maze)记录造模前及造模后给予相应干预的模型大鼠在第24h、3d、5d、7d、14d的逃避潜伏期和穿越平台次数等行为学指标的影响,并在规定节点24h、3d、5d、7d、14d后在相应亚组采集脑组织标本,进行HE染色,镜下观察摄片,部分用Ca MKⅡ免疫组化分析。结果:本次实验造模成功,按照NSS评分筛选,大鼠脑功能均中重度缺损。总共致死48只大鼠(致死率27.0%)。所有大鼠造模前均脑功能完整,造模后,首日均表现学习和记忆能力变差。1.水迷宫结果:模型组大鼠在各时间点逃避潜伏期明显长于其他各组,穿越平台次数明显小于其他各组,差异有统计学意义(P0.05);第24h-3d内B、C、D两两比较无统计学差异。第5天,B组和C组有统计学差异(p0.05),C组优于B组;B组和D组无统计学差异(p0.05);C组与D组无统计学差异(p0.05)。第7天,B组与C组、D组均有统计学差异,但C组与D无统计学差异。第14天B、C、D三组比较两两均有统计学差异,其中潜伏期时间B组A组D组C组,穿越平台次数B组A组D组C组,有统计学意义,A与E两组无统计学差异;2.HE染色24h-5d可见挫伤灶细胞周围见大量液化坏死、炎性细胞浸润,C、D组较其他组有神经元和微血管数量较多。7-14天时发现水肿较前减轻,但仍有大量炎性细胞浸润及胶质细胞增生,C组、D组神经元及周围微血管数量均高于模型组;3.脑损伤后不同时间Ca MKII平均光密度值比较:A和E组无统计学差异,B、C、D组大鼠的脑组织标本中在24h-3d内可检测到Ca MKll的高度表达,无明显差异(p0.05)。5天再次检测发现各组大鼠脑组织内Ca MKll细胞阳性率开始下降,B组和C组有差异(p0.05),C组优于B组;B组和D组无差异(p0.05),C组与D组无差异(p0.05)。7-14天检测发现B组Ca MKll表达水平仍高于其他各组,B、C、D组两两比较有统计学差异(p0.05),其中平均光密度值B组D组C组A组,有明显统计学差异(p0.05)。结论:1.健脑智胶益囊可以使TBI后大鼠学习记忆神经行为学有所改善,在行为学宏观上说明了其对学习记忆障碍的治疗作用;2.健脑智胶益囊可能通过促进海马区神经元再生和稳定内环境,促进神经元和微血管数量增加,从而改善学习记忆障碍;3.健脑益智胶囊可抑制Ca MKⅡ表达,可能诱导该酶恢复活性,减轻或抑制神经元损伤和保护脑功能以及促进损伤后学习记忆障碍的恢复。
【关键词】：健脑益智胶囊 颅脑损伤 行为学实验 HE CaMKⅡ
【学位授予单位】：陕西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R651.15
【目录】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 引言10-11
• 第一章 研究背景11-20
• 一.中医学对颅脑损伤后学习记忆障碍的认识11-17
• 1.中医学与颅脑损伤11-16
• 2.中医学对学习记忆障碍研究16-17
• 二.现代医学对颅脑损伤后学习记忆障碍的认识及治疗概况17-20
• 1.颅脑损伤的研究进展17
• 2.现代医学对学习记忆研究17-18
• 3.颅脑损伤后学习记忆功能障碍认识18-20
• 第二章 实验研究20-33
• 一.材料与方法20-22
• 1.材料20-21
• 2.实验方法21-22
• 二.相应实验时期观察检测海马系列指标22-24
• 1.大鼠的神经行为学检测22-23
• 2.实验对象的组织病理检测23-24
• 3.图像采集与数据分析24
• 三.实验结果24-29
• 1.大鼠TBI造模结果24-25
• 2.Morris水迷宫测试结果25-26
• 3 大鼠海马组织病理学观察结果26-29
• 四.讨论29-32
• 1.关于模型动物的选择29
• 2.大鼠脑创伤模型制作及评价29
• 3.关于对照药物的选择29-30
• 4.大鼠死亡原因分析30
• 5.健脑益智胶囊对TBI后神经行为学的影响30-31
• 6.脑损伤后脑神经元形态的变化及机制探讨31
• 7.健脑益智胶囊对TBI后脑组织海马组织钙离子／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKll)蛋白表达的影响31-32
• 五.结论32-33
• 结语33-34
• 参考文献34-40
• 附录40-43
• 致谢43

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