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三种拮抗剂阻断SDF-1/CXCR4信号通路对OA软骨细胞生物学作用研究

发布时间:2023-11-02 18:29
  第一部分人骨关节炎软骨细胞体外培养与鉴定[目的]体外培养并扩增人骨关节炎软骨细胞,并对培养的软骨细胞进行鉴定,为后续实验奠定基础。[方法]收集确诊为骨关节炎(Osteoarthritis,OA)行膝关节置换术患者的软骨组织块,采用胰酶联合Ⅱ型胶原酶两步消化法体外培养人骨关节炎软骨细胞。第1 代(Passage1,P1) OA 软骨细胞培养第 1、2、4、6、8、10、12 天时,MTT检测软骨细胞生长曲线。P1代细胞培养2天时,采用甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原蛋白免疫组化染色鉴定软骨细胞,Annexin V/PI凋亡试剂盒染色细胞并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。[结果] (1)OA软骨原代细胞形态为小多角形,胞膜伸展,折光性好,软骨细胞聚集成生发中心呈铺路石样,软骨细胞生长较慢,至14-18天时方可长满培养瓶;传代后细胞形态逐渐增大,细胞触角增多,胞膜伸展变宽,细胞形态呈宽大扁平状,折光性降低,细胞增殖缓慢。(2)MTT检测后发现,P1代软骨细胞在1-3天为细胞增殖潜伏期,4-8天为对数生长期,10天以后为平台期,整个生长曲线呈“S”状。(3)甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色见所培养细胞均为...

【文章页数】:130 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
    参考文献
第一部分 人骨关节炎软骨细胞体外培养与鉴定
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    6 参考文献
第二部分 三种拮抗剂阻断SDF-1/CXCR4信号通路对OA软骨细胞生物学效应的影响
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    6 参考文献
第三部分 计算机模拟三种拮抗剂与CXCR4分子靶点对接研究
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    6 参考文献
第四部分 基于计算机模拟的小分子探针设计与生物学特性研究
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果
    4 讨论
    5 结论
    6 参考文献
全文总结
综述一、SDF-1/CXCR4信号通路在骨关节炎中的研究进展
    参考文献
综述二、小分子标记探针在药物靶点发现中的研究应用
    参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢



本文编号:3859523

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