RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖与侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响

发布时间：2017-10-12 04:17

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【摘要】：目的探讨RNAi干扰Twist基因对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株增殖、侵袭力及E-钙黏蛋白甲基化的影响。方法培养人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株,分别转染siRNA-Twist(siRNA-Twist组)、阳性对照siRNAGAPDH(阳性对照组)和阴性对照错义链(阴性对照组),利用实时荧光定量PCR技术检测各转染组细胞中Twist和E-cad基因表达,Western blot法检测各转染组细胞中Twist和E-cad蛋白表达,MTT比色法检测各转染组细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测不同转染组细胞中Ecad甲基化表达。结果 siRNA-Twist组细胞中Twist mRNA和Twist蛋白表达量均低于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P0.05);siRNA-Twist组细胞中E-cad mRNA和E-cad蛋白表达量均高于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P0.05);与阳性对照组和阴性对照组相比,siRNA-Twist组细胞转染48 h~96 h时细胞增殖能力明显减弱,差异均具有统计学意义(P0.05);siRNA-Twist组细胞迁移细胞数和侵袭细胞数均低于阳性对照组和阴性对照组,差异均具有统计学意义(P0.05);MSP检测结果显示,siRNA-Twist组细胞中E-cad甲基化扩增条带呈弱阳性,表达强度显著低于阳性对照组和阴性对照组,而非甲基化扩增条带呈阳性。结论特异性抑制Twist基因表达可能通过影响E-cad甲基化而上调E-cad表达,从而抑制细胞增殖及侵袭能力,有望为喉鳞状细胞癌基因治疗提供新的靶点。
【作者单位】： 平顶山市第二人民医院耳鼻咽喉科;中国医科大学第四医院耳鼻咽喉科;
【关键词】： 喉鳞状细胞癌 RNAi干扰 Twist基因 侵袭力
【基金】：辽宁省自然科学基金(2013021008)
【分类号】：R739.65
【正文快照】： 沈阳110032)喉鳞状细胞癌作为头颈部常见恶性肿瘤,恶性程度高、侵袭力强,占所有恶性肿瘤的2%左右,已成为仅次于肺癌的呼吸道第二位高发恶性肿瘤[1]。随着临床诊疗技术的进步,该病治疗效果得到很大改善,但患者预后仍不佳,远期生存率较低[2]。Twist基因是胚胎发育过程中关键性调

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本文编号：1016597