噪声引起的耳蜗损伤及表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的防护作用

发布时间：2017-10-17 19:23

  本文关键词：噪声引起的耳蜗损伤及表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的防护作用

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【摘要】：噪声可使听功能发生不可逆性丧失,导致噪声性聋(Noise Induced Hearing Loss, NIHL)。噪声暴露后,耳蜗内产生大量自由基,其发生氧化应激导致毛细胞死亡。如一氧化氮自由基(NO)被氧化为过氧亚硝基阴离子,后者进一步硝基化,生成3-硝基酪氨酸(3-NT)。绿茶中的荼多酚有很强的抗氧化活性,表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate, EGCG)是其中抗氧化作用最强的成分,具有抗炎、抗衰老、抗突变、抗癌、保护神经及清除体内自由基等作用。在本课题中,我们对豚鼠行预防性腹腔注射EGCG,从听功能和形态学两方面研究其对噪声性聋的防护作用。一、噪声引起的听力损失及EGCG对听功能的保护目的：建立噪声性聋动物模型,探究EGCG对豚鼠噪声性听力损失的防护作用。方法：45只豚鼠随机分为3组：EGCG+噪声组,生理盐水+噪声组,正常对照组。EGCG+噪声组和生理盐水+噪声组豚鼠在接受噪声暴露(120 dB SPL,4h)前一日及每次暴露前1h分别腹腔注射EGCG和生理盐水(25mg/1000g),正常对照组不予噪声暴露。噪声暴露后,检测三组豚鼠听性脑干反应(ABR)来评估豚鼠听力下降程度。结果：正常对照组豚鼠ABR阈值为22±2.74 dB SPL, EGCG+噪声组豚鼠ABR阈值为52.00±9.03 dB SPL,生理盐水+噪声组豚鼠ABR阈值为71.00±4.18 dB SPL,两组间有显著的统计学差异(P0.01)。噪声暴露后的第1、3、7和14天进行ABR检测，EGCG+噪声组和生理盐水+噪声组豚鼠ABR阈值均有一定程度的恢复,但前者ABR阈值均较后者更低(P0.01)。以短纯音(Toneburst)为刺激声,两组豚鼠ABR阈值在2k、4k、8k、16k各频率均具有统计学差异(P0.05)。结论：预防性腹腔注射EGCG可减轻噪声引起的听力损失。二、噪声引起的耳蜗形态学变化及EGCG的防护作用目的：观察噪声引起的耳蜗3-NT增加及其导致的外毛细胞损伤,探究预防性腹腔注射EGCG的防护作用。方法：通过DAPI染色细胞核、鬼笔环肽(Phalloidin)染色细胞骨架并行外毛细胞计数,3-硝基酪氨酸(3-NT)染色、外毛细胞运动蛋白(Prestin)染色对比各组豚鼠耳蜗内3-NT差异及细胞结构的变化。最后进行半定量,比较组间差异。结果：60倍激光共聚焦显微镜下成像并计数外毛细胞,正常对照组为60.1±0.71个,生理盐水+噪声组为43.5±2.39个,EGCG+噪声组为53.9±1.63个。组间差异具有统计学意义(P0.05)。IHC染色显示,与生理盐水+噪声组相比,EGCG+噪声组豚鼠外毛细胞形态较好，Prestin染色清晰,3-硝基酪氨酸(3-NT)染色较轻。半定量结果显示两组间具统计学差异。结论：预防性腹腔注射EGCG可降低耳蜗内一氧化氮自由基(NO)含量,减轻噪声引起的外毛细胞损伤。
【关键词】：噪声损伤 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) 3-硝基酪氨酸 抗氧化
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R764.43
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-15
• 参考文献12-15
• 第一部分 噪声引起的听力损失及EGCG对听功能的保护15-26
• 引言15-16
• 材料与方法16-18
• 结果18-21
• 讨论21-24
• 参考文献24-26
• 第二部分 噪声引起的耳蜗形态学变化及EGCG的防护作用26-48
• 引言26
• 材料与方法26-31
• 结果31-41
• 讨论41-44
• 参考文献44-48
• 文献综述48-58
• S每嘉南，
  
  本文编号：1050594
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