金黄色葡萄球菌肠毒素B诱导人鼻黏膜上皮细胞表达黏蛋白MUC5AC的分子机制

发布时间：2017-10-17 23:38

  本文关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B诱导人鼻黏膜上皮细胞表达黏蛋白MUC5AC的分子机制

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【摘要】：为了观察金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对诱导人鼻钻膜上皮细胞分泌粘蛋白MUC5AC的影响,并初步探讨其作用机制,本研究首先在体外培养人鼻黏膜上皮细胞株HNEpC,用不同浓度的SEB孵育细胞0~24 h,ELISA检测培养上清中MUC5AC和转化生长因子-α(TGF-α)的含量;实时定量PCR检测MUC5AC mRNA表达水平;Western blot分析表皮生长因子受体(EGFR)的磷酸化。同时采用肿瘤坏死因子转化酶(TALE)siRNA干扰其表达双察其对TGF-α分泌的影响最后采用TGF-α中和抗体、EGFR抑制剂AG-1478或TALE抑制剂TAPI处理细胞,观察其在介导MUC5AC分泌中的作用。结果显示,1 ng/mL、10 ng/mL和100 ng/mL SEB作用鼻黏膜上皮细胞24 h后,可明显诱导其分泌MUC5AC并表达其mRNA,且其分泌水平随着SEB浓度的增高或时间的延长而逐渐增多。SEB也能诱导鼻黏膜上皮细胞分泌TGF-α,并磷酸化EGFR。给予10μmol/L TALE抑制剂TAPI处理细胞后,TGF-α和MUC5AC分泌水平显著减少,采用TALE siRNA干扰其表达后,TGF-α和MUC5AC也得到了类似结果。采用TGF-α中和抗体预孵育细胞30 min后,可明显抑制EGFR磷酸化。此外,TGF-α和EGFR中和抗体以及AG-1478预处理也可降低MUC5AC分泌。以上结果表明SEB经TALE/TGF-α/EGFR诱导人鼻黏膜上皮细胞表达MUC5AC。
【作者单位】： 南华大学附属第一医院耳鼻喉科;
【关键词】： 金黄色葡萄球菌肠毒素B 表皮生长因子受体 肿瘤坏死因子α转化酶 转化生长因子-α 粘蛋白AC
【基金】：湖南省科技计划项目(2013SK3114) 湖南省分子靶标新药研究协同创新中心资助项目(湘教通2015351)共同资助
【分类号】：R765
【正文快照】： 慢性鼻-鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,C R S)是一种多因素所致的鼻黏膜纤毛功能障碍,是耳鼻喉科最常见的多发病之一。其发病机制目前尚未完全阐明,遗传因素、感染因素、免疫功能紊乱以及环境因素均是C R S的重要诱因(Stevens et al.,201 5;谢伟伟等,201 3)。C R S一个显著的

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本文编号：1051702