siRNA沉默Gankyrin基因对喉鳞癌Hep-2细胞生物学行为的影响

发布时间：2017-10-21 04:42

  本文关键词：siRNA沉默Gankyrin基因对喉鳞癌Hep-2细胞生物学行为的影响

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【摘要】：目的 :观察小干扰RNA(small interference RNA,si RNA)沉默Gankyrin基因对喉鳞癌Hep-2细胞的生物学行为影响。方法:用si RNA沉默喉鳞癌Hep-2细胞中的Gankyrin基因,运用实时定量反转录聚合酶链反应(q RT-PCR)及蛋白印迹法(Western blot)技术检测转染前后Gankyrin m RNA及蛋白的表达。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,细胞划痕损伤实验和Transwell小室实验检测细胞迁移能力,Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测Gankyrin下调后p53蛋白的表达。结果:q RT-PCR和Western blot结果显示,Gankyrin si RNA组Gankyrin m RNA和蛋白的相对表达量均低于对照si RNA组和未处理组(P0.001)。CCK-8法显示Gankyrin si RNA组细胞增殖速度明显下降(P0.001)。流式细胞仪检测结果表明,Gankyrin si RNA组细胞凋亡率[(7.70±1.12)%]明显高于对照si RNA组[(2.34±0.32)%]和未处理组[(1.82±0.29)%],差异有统计学意义(P0.001);与两对照组相比,Gankyrin si RNA组G1期比例增加,S期比例减少,差异有统计学意义(P0.001)。细胞划痕损伤实验和Transwell小室实验显示Gankyrin si RNA组的细胞迁移能力明显减弱(P0.01);Matrigel侵袭实验显示Gankyrin si RNA组细胞侵袭能力与对照si RNA组和未处理组比较,差异无统计学意义(P0.05)。Gankyrin表达下调增加了Hep-2细胞中p53蛋白的表达,差异有统计学意义(P0.001)。结论:Gankyrin表达下调能抑制Hep-2细胞的增殖和迁移,可能与细胞凋亡、细胞周期改变及p53的表达密切相关。
【作者单位】： 徐州医学院研究生学院;徐州医学院附属医院耳鼻咽喉头颈外科;南京医科大学附属江苏省肿瘤医院头颈外科;
【关键词】： 喉肿瘤 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 Gankyrin
【基金】：江苏省自然科学基金(BK20151561)
【分类号】：R739.65
【正文快照】： 南京医科大学学报Gankyrin是近年新发现的癌基因。2000年,日本学者Higashitsuji等[1]在人肝癌组织c DNA文库中发现了Gankyrin基因,通过对比肝癌组织与正常组织,首次提出Gankyrin m RNA在肝癌组织中高表达。研究发现,Gankyrin可通过多种信号通路影响肝癌细胞的生物学行为,对肿

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