小鼠microRNA-135a与STAT6靶点作用的体外研究

发布时间：2017-10-27 09:30

  本文关键词：小鼠microRNA-135a与STAT6靶点作用的体外研究

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【摘要】：目的结合TargetScan软件预测,体外验证小鼠microRNA-135a(miR-135a)与信号传导及转录激活因子6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)的靶点结合作用。方法将聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增的靶基因STAT6的非编码3'UTR和突变基因分别克隆到双荧光素酶报告载体中,构建野生型和突变型载体。分别将miR-135a模拟物、模拟对照物与靶基因野生型、突变型质粒载体共转染体外培养的293T细胞,测定载体的校正荧光hluc值及报告荧光hRluc值。结果与模拟对照物相比较,miR-135a模拟物与靶基因STAT6的3'UTR野生型质粒的相互作用能明显降低hRluc/hluc的相对荧光比值,差异有统计学意义(P0.01);而miR-135a模拟物与突变型质粒相作用则对hRluc/hluc的相对荧光比值比较差异无统计学意义(P0.05)。结论小鼠miR-135a与STAT6的3'UTR体外特异性结合作用,为进一步探讨小鼠miR-135a对变应性鼻炎的免疫调控机制提供了依据。
【作者单位】： 广州军区武汉总医院耳鼻喉科;武汉大学人民医院耳鼻咽喉-头颈外科;
【关键词】： MicroRNA 信号传导及转录激活因子 模拟物 小鼠 变应性鼻炎
【基金】：国家自然科学基金项目(81070766)
【分类号】：R765.21
【正文快照】： MicroRNA(miRNA,miR)是一类单链小分子RNA,通过非编码3'UTR与靶基因miRNA特异性结合,抑制靶基因miRNA翻译蛋白质,在转录后水平发挥着重要的基因表达调控作用[1]。前期研究[2]发现,在变应性鼻炎小鼠的鼻黏膜中,miR-135a模拟物对变应性鼻炎Thl/Th2细胞因子的失衡有免疫调控作用,

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本文编号：1102920